端粒酶检测的研究进展.docVIP

  端粒酶检测的研究进展# 丁霖，钱若灿，林曼菲* （南京大学化学化工学院，南京，210093） 5 10 15 20 25 30 35 40 摘要：端粒酶是一种核糖核蛋白复合物，其作用相当于端粒末端转移酶，利用自身 RNA 为 模板，在端粒末端添加 TTAGGG 重复片段。近年来，端粒酶的研究已成为热点，由于其在 大部分肿瘤细胞中高表达，与肿瘤细胞的持续分裂密切相关，因此端粒酶的高灵敏、高特 异性检测对癌症的早期发现、监测、预后和靶向药物筛选有重大意义。本文主要评述了端 粒酶检测方面的研究进展，介绍了无需 PCR 的检测端粒酶活性的最新方法，也就端粒酶研 究的前景进行了展望。 关键词：分析化学；端粒酶；检测；肿瘤 中图分类号：O657 Recent advances in detection strategies for telomerase activity DING Lin, QIAN Ruocan, LIN Manfei (School of Chemistry Chemical Engineering, Nanjing University, Nanjing, 210093) Abstract: Telomerase, a ribonucleoprotein complex, is a telomere terminal transferase that can add TTAGGG repeats on telomeres using its intrinsic RNA as the template. In recent years, telomerase has become a research hotspot due to its high activity in most types of cancer cells and its close correlation with the continuous division of cancer cells. Therefore, highly sensitive and selective detection of telomerase is crucial for cancer diagnosis, monitoring, prognosis and targeted drug screening. This review introduces the research progress on telomerase analysis and highlighted some of the latest PCR-free detection methods. Meanwhile, we also give a discussion on the future directions of telomerase analysis research. Key words: analytical chemistry; telomerase; detection; cancer 0 引言 恶性肿瘤可导致其周边组织生长失控及远程侵袭转移，已成为威胁人类健康的主要疾病 之一，因此发展肿瘤的早期检测方法对于癌症预防和治疗都具有重要积极意义[1]。DNA， RNA 和蛋白质等可以作为肿瘤标志物，近年来受到广泛关注和研究。而端粒和端粒酶的发 现，为理解肿瘤机理、提出新的肿瘤标志物和治疗靶标提供了新的维度[2]。 细胞分裂引起细胞衰老，而细胞寿命以细胞的增殖次数来确定[3~4]。在细胞生长过程中 存在一种内在的分子计数机制以控制细胞分裂的终止，而染色体逐渐失去端粒末端就是这样 一种重要的计时机制[5~11]。人类端粒末端包含着 TTAGGG 重复序列，是保持染色体完整和 稳定性的重要结构。端粒酶是一种核糖核蛋白酶复合体，主要由两部分组成：端粒酶催化亚 单位（human telomerase reverse transciptase，hTERT）以及端粒 RNA（human telomerase RNA, hTR）[4]。端粒酶以自身的 RNA 为模板，逆转录合成端粒 DNA 重复序列并将其添加到端粒 末端，从而实现端粒长度稳定，并且保持染色体的相对恒定[11]。 在正常的人体细胞中，端粒酶的活性受到相当严密的调控，只有生殖细胞、造血干细胞 等不断分裂的细胞才表现出端粒酶活性[12]。而在肿瘤细胞中，端粒酶的活性被激活，通过 基金项目：教育部博士点基金新教师基金项目（20100091120034） 作者简介：丁霖（1981 年生），女，副教授，主要研究方向：生物分析化学. dinglin@nju.edu.cn -1-   逆转录来维持端粒的长度，从而实现肿瘤的