急性运动对骨骼肌线粒体生物发生基因转录信号通路的时相性影响.pdfVIP

论 文 摘 要 急性运动可诱导线粒体生物发生，表现为线粒体数量增加，功能增强。这是 急性运动诱导骨骼肌形态和功能发生应激变化的主要机制之一。线粒体生物发生 受到核基因和线粒体基因双重控制，而细胞核与线粒体之间的相互影响增加了研 究线粒体生物发生的复杂性。其转录因子调控的主要信号网络是：共激活因子（如 PGC- 1α/β）辅激活核转录因子 （如NRF- 1/2），进而激活线粒体转录因子 （Tfam 和TFBMs ），且PGC- 1与NRF- 1结合后，还可协同作用于Tfam基因的启动子，而 Tfam通过调控线粒体DNA的转录和复制，从而介导线粒体生物发生。 普遍认为，PGC- 1β与PGC- 1α具有相似的结构，但他们利用不同的核受体， 虽然PGC- 1β不能直接诱导NRF- 1的表达，但它可以与NRF- 1结合，作为NRF- 1 目 标基因的共激活因子，使线粒体的基因表达增加。Tfam和TFB1M、TFB2M是调 节线粒体转录和复制相关通路的关键靶点，可诱导线粒体的生物发生。运动诱导 Tfam和TFB1M、TFB2M表达及其蛋白水平的变化，而急性运动的应激反应又受 到PGC- 1家族的调控和影响。迄今为止，大量研究证实：长期的规律性运动诱导 骨骼肌线粒体生物发生，并与PGC- 1转录级联信号通路的适应性激活密切相关。 线粒体持续动态的结构变化及其非周期性的DNA复制、转录，暗示线粒体生物 发生在急性运动及其恢复过程中面临能量供需的急剧变化，可能具有较高的时相 敏感性，PGC- 1转录级联信号很可能参与其中，但是目前鲜有研究证实这一假设。 目的：探讨小鼠骨骼肌 PGC- 1β、Tfam、TFB1/2M 基因转录在急性运动及其 恢复阶段中的时相性变化，探讨急性运动对骨骼肌线粒体生物发生过程中基因转 录水平的时相性影响。 方法：将 80 只雄性小鼠在适应性训练三天后，随机分成安静组（A ）、急性 运动组（B ）模型和急性运动不同时间恢复组（C ）模型，按照不同运动时间和 不同运动后恢复时间分为 9 组：B45 、B90、B120、B150 和 C3、C6、C 12、C 18、 C24 ，每组各 8 只。对各运动组小鼠进行急性递增负荷运动。安静组动物于安静 状态、急性运动组动物于运动中不同时间点（45min、90min、120min、150min）、 急性运动后不同恢复时间组动物于不同的恢复时间点（3h、6h、12h、18h、24h）， 即刻颈椎脱臼处死，取骨骼肌组织，提取总 RNA，检测 PGC- 1β、Tfam、TFB1/2M 基因转录水平；分离骨骼肌线粒体，测定 NO 、NOS 水平。 结果： （1）急性运动组小鼠骨骼肌线粒体 NO 含量较安静组显著升高，在 B45 时 刻开始显著性增加，于 B90 时刻达到峰值，B 120 时刻略有下降，后在 B150 时 刻又轻微上升；总 NOS 活性从 B90 时刻开始较安静组显著降低，后持续下降至 B150 时刻较安静组具有极其显著地下调趋势；在急性运动恢复阶段NO 含量于 C3 时刻继续轻微上升，在 C6 时刻开始下降，于 C 18 时刻达到恢复期最低值， 而NOS 活性在 C3 时刻达到整个模型中的最低值，后于C 18 时刻开始显著增加， 至 C24 时刻基本恢复到安静时水平 （2 ）与安静组相比，急性运动组小鼠骨骼肌 PGC1-β mRN A 的表达在运动的 早期无显著性差异，随着运动时间的延续呈现递增的趋势，于 B120、B150 时刻 达到峰值，显著高于安静组；急性运动后恢复期，小鼠骨骼肌 PGC1-β mRNA 的 表达总体上也与安静组无显著性差异，C3 时刻达到最低值，其后逐渐上升，恢 复至 C 18 时刻显著增高达到峰值。 （3 ）急性运动至 B45 时刻，小鼠骨骼肌 Tfam mRNA 和 TFBMs mRNA 表达 表达急剧上升，显著高于安静组，后随着运动时间的延续，表达逐渐降低；Tfam 表达于 B120 时刻开始显著性下降，TFB1M 于 B45 时刻达到峰值，TFB2M 至 B150 时刻达到最低谷；在急性运动后恢复期，小鼠骨骼肌 Tfam 表达于 C6 时刻 达到最低值，后随着恢复时间的延续增加，于 C24 时刻达到峰值；TFBMs 表达 整体随着恢复时间的延续逐渐下降，但恢复至 C 12 时刻出现暂时的显著性增高。 结论： （1）急性运动过程中线粒体 NO 含量增加，但线粒体 NOS