上下坡跑台运动对去卵巢小鼠破骨细胞分化的影响.pdfVIP

论论 文文 摘摘 要要 论论 文文 摘摘 要要 破骨细胞的大量分化和活化是绝经后骨质疏松症的根本原因，绝经后妇女 由于雌激素的迅速下降，导致骨组织破骨细胞的大量分化和活化，破骨细胞的大 量生成和激活造成骨吸收作用迅速增加，超过了成骨细胞作用的骨形成作用，骨 吸收和骨形成的动态平衡被破坏，从而造成高转换型骨质疏松症。研究表明，运 动可从多方面调节骨代谢，骨组织具有根据其所处的力学环境而调整其自身结构 的特性，如长期处于微重力环境下的宇航员，其骨质流失的速度是惊人的，承重 骨的骨质流失的速度大约为每月 0.5-2 ％，而适当的运动可以有效提高骨密度， 防止骨质流失，已有大量实验分别报道了游泳、跳跃、攀爬和抗阻训练等干预方 式的成骨效应。然而，有关运动调节绝经后骨重建的细胞及分子机制的研究还很 缺乏，特别是运动对于绝经后破骨细胞分化影响的研究至今仍未见报道。 目的目的：本研究通过去卵巢小鼠模拟妇女绝经后骨重建特点： ，对比上、下坡 目的目的：： 跑台运动对于绝经后骨质疏松的预防效果，并重点研究这两种不同的运动方式对 于破骨细胞分化及活化的影响，以期在细胞及分子水平上解释不同运动方式影响 绝经后骨重建的机制。 方法方法：：64 只 8 周龄 C57 BL/6 雌性小鼠，随机分为 4 组：假手术安静组（S， 方法方法：： n=16 ），去卵巢安静组（O，n=16 ），去卵巢上坡跑组（U ，n=16 ），去卵巢下坡 跑组（D ，n=16 ），每组 16 只。假手术安静组小鼠行去卵巢假手术，其余三组小 鼠均摘除卵巢。训练方案为：去卵巢上坡跑组进行上坡跑训练，而去卵巢下坡跑 组进行下坡跑训练，跑速均为 0.8km/h，坡度分别为±9°，每次40 分钟，每周 训练 5 次，共训练 8 周。8 周后，通过Kodak X 射线骨密度仪测试股骨和胫骨骨 密度；通过树脂包埋切片技术和组织形态计量术测试胫骨组织形态计量学指标； 通过荧光定量 PCR 检测股骨 OPG、RANKL 、RANK 、M-CSF 、TNF- α、IL-6 和 TRAP 的基因表达水平；通过骨组织 TRAP 染色技术检测股骨 TRAP 蛋白水 平；通过骨髓破骨细胞原代培养技术检测破骨细胞分化情况；通过Western blot 测定破骨细胞分化 NF- κB 信号通路 p65 、I κB α、p-p65 和 p-I κB α的蛋白表 达水平。 结果结果：（： 1）与假手术安静组相比，去卵巢小鼠体重增长速度显著增加，而 结果结果：： 跑台运动可有效抑制小鼠因去卵巢引起的体重过快增长。 （2 ）与假手术安静组相比，去卵巢小鼠股骨和胫骨骨密度明显降低，而跑 台运动可有效阻止小鼠去卵巢后的骨密度下降，且下坡跑效果优于上坡跑。 （3 ）与假手术安静组相比，去卵巢小鼠胫骨骨小梁数目和体积密度明显减 小、骨小梁间距离增大、骨小梁厚度变薄而相互间排列较凌乱、正常的立体网状 结构受到破坏。而跑台运动可有效改善小鼠因去卵巢引起的骨质疏松性变化，且 下坡跑效果优于上坡跑。 （4 ）与假手术安静组相比，去卵巢小鼠骨组织破骨细胞特异性酶 TRAP 的 基因及蛋白表达水平明显升高，说明去卵巢手术增强了小鼠破骨细胞分化和活化 的能力。跑台运动可有效抑制小鼠因去卵巢引起的破骨细胞的分化和活化，且下 坡跑效果优于上坡跑。 （5 ）与假手术安静组相比，去卵巢小鼠骨组织RANKL、 M-CSF 和 RANK 基因表达显著升高，而 OPG 的基因表达显著下降，说明去卵巢小鼠骨组织 OPG-RANKL-RANK 系统各因子的变化有利于破骨细胞的大量分化和骨吸收。 跑台运动可有效降低小鼠因去卵巢引起的骨组织 RANKL 和 M-CSF 基因表达 的升高和OPG 的基因表达的下降，且下坡跑效果优于上坡跑。跑台运动对骨组 织 RANK 基因表达的影响不明显。 （6 ）与假手术安静组相比，去卵巢小鼠骨组织 IL-6 和 TNF- α基因表达显 著升高，而 IL-6 和 TNF- α则会通过OPG-RANKL-RANK 系统依赖性和非依赖 性途径促进破骨细胞的分化和骨吸收。跑台运动可