抑癌基因TSG101及其剪接变异体在乳腺癌中表达的研究.pdfVIP

抑癌基因TSG101 及其剪接变异体在乳腺癌中表达的研究 中 文 摘 要 抑癌基因TSG101 及其剪接变异体在乳腺癌中表达的研究 摘 要 目的 研究乳腺癌组织中抑癌基因TSG101 及其四种剪接变异体的表达规律及突变 探讨此基因在乳腺癌发生发展过程中扮演的角色 方法 对手术切除的24 例新鲜乳腺癌组织进行总RNA 抽提 设计5 对针对TSG10 1 基因全长及其四种剪接变异体 VA VB VC 和VD 的特异引物做RT-PCR PCR 产物 进行琼脂糖凝胶电泳观察分析目的产物 设计引物对TSG101 基因全长 PCR 产物进行 测序 663bp 1276bp 结果与基因库TSG101 基因序列比对分析 四种剪接变异体用 各自的扩增引物测序 以确定获得的为目的产物 结果 在24 例组织中均扩增出了TSG101 全长及四种剪接变异体片断 24 例乳腺癌 组织中TSG101 剪接变异体C 表达的差异最小 剪接变异体A B 及TSG101 全长的表 达差异次之 剪接变异体D 的表达差异最大 测序结果24 例组织中20 例 83.3 经 序列比对与基因库的TSG101mRNA 序列 100 一致 另 4 例 16.7 均于 TSG101 基因第4 外显子mRNA 第798bp 处存在 C T 杂合性点突变 结论 1 24 例乳腺癌组织均有TSG101 基因全长及VA VB VC 和VD 四种剪接变异 体的表达 各成分的表达存在不同程度的差异 以VC 差异最小 VD 差异最大 上述差 异与乳腺癌生物学特性的关系有待进一步研究和阐明 2 16.7 4/24 乳腺癌病例存 在TSG101mRNA 第798bp 位碱基 C T 的杂合性点突变 此发现为国内外首次报道 其可能为乳腺癌发生的分子遗传基础提供了新线索 关键词 TSG101 基因 乳腺癌 剪接变异体 突变 抑癌基因TSG101 及其剪接变异体在乳腺癌中表达的研究 英 文 摘 要 The expression of geneTSG101 and its splice variants in breast cancer Abstract Objective: To investigate the expression and mutation of tumour suppressor gene TSG101 and its 4 splice variants (V V V and V ) in breast cancer in order to study the role of A, B, C D TSG101 in tumorigenesis and development of breast cancer. Methods: Total RNA of 24 surgical excised breast caner tissues was isolated. Full length of gene TSG10 1 and its splice variants V V V and V were tested by the assay of RT-PCR A, B, C D using 5 pairs of specific primers. Agarose electrophoresis was per