Ang-(1-7)对AngII致内皮损伤保护作用的研究.pdfVIP

中 文 摘 要 目的 通过动态观察血管紧张素 II 和血管紧张素-(1-7)作用于内皮细胞后细胞形态和功 能等的变化，探讨血管紧张素-(1-7)对血管紧张素 II 致内皮损伤的保护作用。 方法 人脐静脉内皮细胞株(ECV-304)体外培养，设对照组，AngII 组，Ang-(1-7)组，混 合组。分别于 6h、12h、24h后，倒置相差显微镜下观察内皮细胞的形态学变化；收集 细胞，流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)的含量；收集各组条件培养基，硝酸还原酶 法检测培养基中一氧化氮(NO)的含量；酶联免疫吸附法(ELISA)检测培养基中纤溶酶原 激活物抑制物-1(PAI-1)、组织型纤溶酶原激活物 (tPA)的含量；硫代巴比妥酸法检测培 养基中脂质过氧化代谢产物丙二醛(MDA)的含量。 结果 ①形态学观察：与对照组相比，AngII组细胞胞体边缘收缩，部分细胞变圆，细 胞间隙增大，甚至出现坏死和脱落等；Ang-(1-7)组细胞的形态与对照组无差别；与 AngII 组相比，混合组细胞损伤性的形态学变化明显减弱，细胞的坏死、脱落现象亦不显著。 ②功能检测：AngII组 ROS、MDA、PAI-1的含量在相应时间点均高于其他三组；Ang-(1-7) 组上述三者的含量与对照组比较无差别；混合组上述三者的含量明显降低，与相应时间 点的 AngII组比较差别有统计学意义。AngII组 NO的含量在相应时间点均低于其他三 组；Ang-(1-7)组 NO的含量与对照组比较无差别；混合组 NO含量明显升高，与相应时 间点的对照组比较无差别。每组 tPA的含量在各时间点没有差别。 结论 Ang-(1-7)对 AngII导致的内皮损伤有形态和功能双重保护作用 关键词 Ang-(1-7)；AngII；动脉粥样硬化；内皮形态；内皮功能 I Abstract Abstract AAbbssttrraacctt Objective Objective OObbjjeeccttiivvee Observing the dynamic changes of morphology and function of vascular endothelial cells induced by Ang-(1-7)and AngII to explore the protective mechanisms of angiotensin - (1-7)onVascular endothelium injuryinduced byangiotensin II. Methods Methods MMeetthhooddss Human umbilical vein endothelial cells( ECV-304)cultivated in DMEM were randomly divided into Control group,AngII group,Ang-(1-7)group and mixed group.After 6,12, 24h, the morphologic changes of endothelial cells were observed with inverted phase contrast microscope. Flow cytometry was used to evaluate reactive oxygen species(ROS) in cells. Nitric oxide(NO)level in the cultured medium was measured by colorimetry.The content of PAI-1 and tPA in the cultured medium was measured by enzyme lined immunosorbent assay(ELISA). The concentration of MDA which was a lipid peroxidation metabolite was measured