BCR-ABL-pIRES-GM-CSF融合基因疫苗在BALB-c小鼠中安全性的检测.pdfVIP

中文摘要中文摘要 中文摘要中文摘要 目的目的 目的目的 检测慢性粒细胞白血病的 BCRABLpIRESGMCSF 融合基因 DNA 疫苗的 安全性。 方法方法 方法方法 SPF 级雄性 BALB/c 小鼠随机分成正常对照组、pIREs 组、pIREsGMCSF 组、BCRABLpIRES 组、BCRABLpIRESGMCSF 组。首先用 RTPCR 检测肌 肉注射部位DNA 疫苗表达情况；其次用 Western blotting 和 ELISA 法检测小鼠 血清中 IL1β 、IL6 、TNFα、INFγ 的表达；最后用光镜观察肝、脾、肾和注射 部位肌肉的细胞形态学变化和电镜法观察肝和肾亚细胞的形态学变化。 结果结果 结果结果 、小鼠的一般情况观察，正常对照组和实验组间没有明显的差异，正常对 照组和实验组间体重差异没有统计学意义(p 0.05) ； 2 、RTPCR 检测发现：pIREs 组，pIREsGMCSF 组，BCRABLpIRES 组， BCRABLpIRESGMCSF 组从局部注射部位肌肉成功扩增出 BCR/ABL 基因片 段，表明 DNA 疫苗在体内表达； 3、Western blotting 方法和 ELISA 方法显示：小鼠血清中 IL1β 、IL6 、TNFα、 INFγ 的表达，正常对照组和实验组差异没有明显的统计学意义(p 0.05) ； 4 、光学显微镜和电子显微镜观察：光镜下，正常对照组和实验组肝、肾、 脾和注射部位肌肉细胞形态结构基本正常，没有出现明显的病理变化。电镜下， 正常对照组和实验组肝细胞和肾细胞核膜清晰，线粒体结构完整，溶酶体和内质 网等细胞器结构完整。 结论结论 结论结论 BCRABLpIRESGMCSF 融合基因 DNA 疫苗免疫 BALB/c 小鼠是可耐受 的，并具有良好的安全性。 I 关键词关键词 关键词关键词 慢性粒细胞白血病；BCR/ABL ；GMCSF ；DNA 疫苗；安全性 基金项目：广州市科技支撑计划 （国际合作）项目, 编号:2009Z1E161 II Abstract Objective Detection of the safety of BCRABLpIRESGMCSF fusio