DRP-2在苯丙胺致小鼠脑损伤中的变化和机制.pdfVIP

中文摘要 目的: 探讨二氢嘧啶酶相关蛋白 2(DRP-2)在苯丙胺致小鼠脑损伤中的变化和机制。 方法: 将60只健康雄性C57BL/6小鼠随机分为：正常对照组、生理盐水组和苯丙胺 组。苯丙胺组又分为1 d、7 d、14 d和28 d 四个组，腹腔注射苯丙胺2 mg/kg/d 。 生理盐水组仅设28 d组，等量生理盐水注射。正常组不予任何处理。建模期间进 行小鼠自主行为活动测试，电脑记录运动总路程、运动总时间、平均速度、最大 速度、慢速运动时间、慢速运动时间/总时间、快速运动时间和快速运动时间/总 时间等指标，检测动物的自主活动度。动物模型建立完成后，按照实验所需方法 取材，采用银染( Nauta)法、免疫组织化学法及Western blotting法等观察苯丙胺对 小鼠脑的毒性损害作用以及对DRP-2及其上游AKT/GSK-3β信号通路的影响。 结果： 1．自主行为学检测：用药前各组小鼠的最大速度、平均速度、运动总路程、 快速运动时间/总时间均没有显著差异(P0.05) 。用药后，苯丙胺7 d、14 d、28 d 组的运动总路程、平均速度、快速运动时间/总时间/最大运动速度比正常对照组 和生理盐水组增加(P0.05) ，而慢速运动时间/总时间在各组间没有显著差异 (P0.05) 。 2 ．溃变神经纤维及其终末的银染结果：Nauta 法染色显示苯丙胺 14 d 和 28 d 组纹状体内可见变性神经纤维呈黑色，正常组和生理盐水组均未发现变性的 神经纤维。 3 ．多巴胺(DA)能神经元及其纤维的变化：苯丙胺 28 d 组小鼠黑质致密部的 DA 能神经元数比其它各组均减少(P0.05) 。苯丙胺 1 d 组和生理盐水组苍白球区 DA 神经纤维密度比正常组增加（P0.05) ，但随着用药时间的延长，苯丙胺 14 d 和 28 d 组苍白球区的 DA 神经纤维密度比正常对照组和生理盐水组降低 (P0.05) 。 4 ．DRP-2 及其蛋白激酶 B/糖原合成激酶-3β(AKT/GSK- 3β)信号通路的变化： I 苯丙胺组纹状体内 DRP-2 的表达较生理盐水组和正常组明显减少(P0.05) ，而 P-DRP-2 的表达苯丙胺 1 d 组与正常组无明显变化(P0.05) ，苯丙胺 7 d、14 d 组 和生理盐水组较正常组增加(P0.05) 。苯丙胺28 d 组 AKT 的表达较正常组和生 理盐水组减少(P0.05) 。苯丙胺7 d、14 d 和 28 d 组 GSK-3β的表达比正常组增 多(P0.05) 。 结论： 1． 苯丙胺可引起小鼠自主活动性增加。 2． 长期使用苯丙胺可导致起小鼠纹状体神经纤维变性。 3． 长期使用苯丙胺可导致起小鼠黑质致密部的 DA 能神经元数目减少，以 及苍白球区 DA 神经纤维密度的降低。 4． 使用苯丙胺可引起小鼠纹状体 P-DRP-2 的增加以及DRP-2 的减少，其机 理与抑制 AKT/GSK-3β信号通路的有密切关系。 关键词： 苯丙胺，脑，损伤，DRP-2 ，信号通路 II Abstract Objective To explore mechanism of dihydropyrimidinase-related protein-2 (DRP-2) change in amphetamine-induced injury in mouse brain. Methods Sixty male C57BL/6 mice with 5-7 weeks of age were randomly divided into the normal group (n=10), the saline group (n=10)and the amphetamine group(n=40). The amphetamine group was subdivided into four subgroups:1 d，7d，14 d and 28 d groups. Mice were treated with amphetamine 2 mg /