Nestin在人胶质瘤组织中的表达及PTEN与nestin的相互作用.pdfVIP

中 文 摘 要 目的： 研究巢蛋白（nestin ）在人脑胶质瘤组织中的表达及意义；研究nestin 在人 胶质瘤细胞株 SWO-38 及其亚系 SWO-Z1、 SWO-Z2 中的表达并初步探讨在肿 瘤微环境中 PTEN 与 nestin 在细胞分化过程中调控的机理。 方法： 通过免疫组化法检测 nestin 在 53 例胶质瘤石蜡标本中的表达，利用 Image- Pro Plus 6.0 图像分析软件检测其在细胞内表达的平均光密度，并分析nestin 的表 达与胶质瘤恶性程度的关系。通过光镜、HE 染色等观察干扰 PTEN 前后细胞的 形态学改变；利用免疫荧光、Western Blotting 等方法观察人胶质瘤细胞株SWO-38 及其亚系 SWO-Z1 和 SWO-Z2 中nestin 的表达情况及其在干扰PTEN 前后的变 化。 结果： 1. 免疫组化结果显示 nestin 在 53 例人脑胶质瘤组织的肿瘤细胞中有表达， 其染色强度与胶质瘤的恶性程度呈正相关，即恶性程度越高，表达越强。Nestin 在肿瘤血管内皮细胞中也都呈阳性表达：在Ⅰ- Ⅱ级组、Ⅲ级组和Ⅳ级组人脑胶 质瘤肿瘤血管内皮细胞 nestin 的平均光密度值(A 值) 为 0.3292±0.1393 、 0.6147±0.1194 和 0.6361±0.1210 ；Ⅰ- Ⅱ级组和Ⅲ级组之间以及Ⅰ- Ⅱ级组和Ⅳ级 两组之间差异有统计学的意义(P 0.01) ，而Ⅲ级组和Ⅳ级组之间差异无统计学意 义(P 0.05) 。 2. Nestin 在胶质瘤细胞株 SWO-38 及其亚系 SWO-Z1 和 SWO-Z2 的表达在 250kD 处（nestin 蛋白分子量）均未见条带，但在 SWO-Z1 细胞的 130kD 处有 nestin 条带，而 SWO-38 和 SWO-Z2 没有相应条带。PTEN 被干扰后，nestin 在 三株细胞的 130kD 处均见表达，且 SWO-Z1 表达有所增加。 结论： I Nestin 在人脑胶质瘤组织的肿瘤细胞和血管内皮细胞中的表达均与恶性程 度呈正相关，其可以作为胶质瘤恶性程度及预后的重要指标。SWO-系细胞株在 PTEN 受到抑制前后 nestin 的表达有变化，提示nestin 在不同分化状态下表达有 差异，PTEN 对 nestin 的表达有影响。SWO-Z1 是 SWO-系细胞中低分化的亚系； SWO-系细胞为进一步研究胶质瘤分化提供了很好的细胞分化模型。 关键词： 胶质瘤；nestin ；PTEN ；分化 II Abstract Obiective: To investigate the expression and significance of nestin in the slices of human gliomas. To investigate the expression of nestin in the human glioma cell lines of SWO-38 and its subseries called SWO-Z1 and SWO-Z2, and to discuss the regulation between PTEN and nestin in cell differentiation of tumor microenvironment. Methods: The average optical of nestin has been detectied in 53 human gliomas slices by immunohistochemistry with the detection by image analysis software called Image-Pro Plus 6.0, and then analyse the correlation between n