曲古霉素A抑制角膜成纤维细胞分化的机制研究.pdfVIP

验研究 03 20 13/ 11 曲古霉素A 抑制角膜成纤维细胞 分化的机制研究 杨玲玲 曲明俐 王 瑶 段豪云 陈 鹏 王 晔 史伟云 周庆军 摘要】 目的 知曲古霉素A （TSA ）在体内外都可抑制肌成纤维化，我们的研究目标是探讨TSA 通过减少活性氧 。 （ ，转 （ROS ）聚集来抑制肌成纤维化的作用机制 方法 细胞模型为人角膜基质细胞系 HTK ），细胞分组如下：对照组 （ ， ， （ ， 化生长因子 TGF β）处理组 TGF β+TSA 处理组 TGF β+ NAD (P)H 氧化酶抑制剂二联苯碘 DPI ）处理组 （ ， （ 。肌成纤维细 TGF β+ 抗氧化剂N- 乙酰谷胱甘肽 NAC ）处理组 TGF β+ Nrf2-ARE 激动剂萝卜硫素 SF ）处理组 胞分化情况分别用α-SMA、F-actin 免 荧光染色和胶原收缩实验来检测，另外我们还检测了细胞内ROS， H O ，谷胱甘肽（GSH ）水平、细胞总抗氧化能力及Nrf2-ARE 信号通路的活化情况。结果 TSA 与Nrf2-ARE 激活 2 2 剂SF 一样，能够抑制TGF β诱导的肌成纤维化，包括α-SMA, F-actin 表达的降低和胶原收缩能力的降低。同时， TSA 也能降低TGF β诱导引起的细胞内ROS 和H O 升高、并能提高细胞内GSH 水平和总抗氧化能力。而DPI 2 2 却只能部分抑制 ，此外， 或NAC 虽然能显著抑制TGF β诱导引起的ROS 升高， α-SMA, F-actin 高表达 TSA 能 诱导Nrf2 核转位并上调Nrf2-ARE 信号通路下游的抗氧化相关基因。用RNA 干扰敲除掉Nrf2 可阻止TSA 对肌 。 （ 成纤维分化的抑制作用 结论 本研究首次指出TSA 通过减少活性氧 ROS ）聚集来抑制TGF β诱导的肌成纤维 —提高Nrf2-ARE 信号通路表达。 化的部分作用机制为—— 关键词】 TSA；Nrf2-ARE ；肌成纤维细胞化；活性氧自由基 ： （ 基金项 国家自然科学基金81170815 ） ： 山东省眼科研究所 作者单位 266071 青岛， 山东省眼科学重点实验室- 省部共建国家重点实验室培育基地 ： ， 通讯作者 周庆军 Email: qjzhou2000@ 膜与外眼病 43 cornea and external disease 03 2013/ 11 验研究 Trichostatin a inhibits transforming growth factor- induced reactive o