聚束微波亚高温热疗诱导人乳腺癌细胞株MCF-7凋亡的研究.pdfVIP

厂 西 医 科 大 学 学 报 2011Aug；28(4) JOURNALOFGUANGXIMEDICALUNIVERRSSIITY o7 聚束微波亚高温热疗诱导人乳腺癌细胞株 MCF一7凋亡的研究 李永强 廖思娜 (广西医科大学附属肿瘤 医院化疗一科 南 宁 530021) 摘要 目的：探讨亚高温热疗诱导人乳腺癌细胞株 MCF7发生凋亡作用 的机制 。方法 ：取对数生长期 的人乳腺癌细胞株 MCF-7细胞及空 白对照组细胞 ，采用 4O～41C，2h聚束微波亚高温热疗分别作用于两组细胞 ，用 AnnexinV—FITc／PI法检 测两组细胞的凋亡率 。结果：聚束微波亚高温(41℃，2h)热疗可以诱导人乳腺癌细胞株 MCF一7凋亡 ，凋亡细胞数随时间的延 长而增多。结论 ：聚束微波亚高温热疗可能通过诱导人乳腺癌细胞株 MCF-7凋亡发挥抗肿瘤作用 。 关键词 聚束微波 ；亚高温 ；热疗 ；乳腺癌细胞株 MCF7；凋亡 中图分类号 ：R730．5 文献标志码 ：A 文章编号 ：1005—930X(2011)04—05l5一O2 近年来 国内外关于热疗有效温度 的研究热点集 中在 UHR2000微波辐射器下进行加温 ，辐射头与 12孔板距离为 41～43。C，且认为低于 41℃的亚高温热疗是通过免疫调节 25～30cm，辐射器有效加温面积大于 16cm ×16cm，加热功 发挥抗肿瘤作用 的。为明确这样 的聚束微波亚高温热疗是 率 6。0～900W ，每分钟测温一次，细胞加热升温时间控制在 否具有抗肿瘤作用 ，并探讨其作用机制 ，本实验进行 了聚束 60min以内，加热温度达 4O～41。C时 ，维持 2h。温度波动 微波亚高温热疗对人乳腺癌细胞株 MCF7作用的研究。 ≤ ±0．2℃ 。 1．2．4 AnnexinvFITC／PI法检测凋亡率 的改变 ：按照实验 1 材料与方法 分组 ，并用相应 的处理因素诱导细胞凋亡后 24，48h检测 ，将 1．1 主要材料 ：UHR一2000高能聚束微波热疗机 由湖南华源 细胞消化 、离心 ，将细胞悬液浓度调整为 1×10／mI后再离 医疗设备有限公 司提供 ；人乳腺癌细胞株 MCF7购 自中科 心，弃上清 ，重悬后将细胞移人流式专用试管 。按实验要求 院上海生物研究所细胞室；RPMI1640培养基、10 胎牛血 加入试剂 。避光 ，室温下孵育 30rain，然后行流式细胞仪检 清 (FBS)购 自Hyclone公司 ；酶标仪 MHK3购 自(热 电)上海 测 。 仪器有限公司 ；AnnexinvFITC／PIapoptosisdetectionkitI 1．3 统计学处理 ：采用 SPSS16．0统计学软件进行统计分 购 自美 国BD公司：流式细胞仪购 自美 国贝克曼库尔特公司。 析 。计量数据以均数 ±标准差 ( ±S)表示 ，采用方差分析 q 1．2 实验方法 检验 ，以Pd0．05为差异有统计学意义 。 1．2．1 体外培养体系：人乳腺癌细胞株 MCF7经解冻、复 苏后 ，常规培养于含 1o 胎牛血清 RPMI1640培养基 中，培 2 结 果 养条件 ：置 37℃，5 CO饱和湿度培养箱培养 。取对数生长 2．1 不 同温度 的聚束微波加热对人乳腺癌细胞株 MCF7 期的细胞备用 。 生长一般情况的影响：在倒置显微镜下观察聚束微波亚高温 1．2．2 实验分组与施加 的处理 因素 ：常规人乳腺癌细胞株 加热组与 37。C空 白对 照组 MCF一7细胞形态 ：4O，40．5℃两 MCF-7培养后 ，根据实验 目的，进行 以下分类处理 ：(1)空 白