产肠毒素大肠杆菌K88黏附素蛋白亚基Fae G在L.lactis中的表达及其抗原性.pdfVIP

中国兽医学报 2009年11月 第29卷 第 11期 ChinJVetSciNov．2009 Vo1．29 No．11 1415 产肠毒素大肠杆菌 K88黏附素蛋 白亚基 FaeG在 L．1actis中的表达及 其抗原性 刘淑杰 ，李永明 ，徐子伟 ，王一成 (1．江南大学食品科学与技术国家重点实验室，江苏无锡 214122； 2．浙江省农业科学院 畜牧兽医研究所 ，浙江 杭州 310021) 摘要 ：在构建 L．1actis表达栽体 pNZ8148-faeG 的基础上 ，将该载体转化到 L．1actisNZ9000中，重组茵经 5“g／L nisin诱导3h，SDS结果显示 ，FaeG在 L．1actis中表达的 目的蛋 白相对分子质量大小约为27000，表达产物 的量达菌体可溶性总蛋 白的 10．89％。westernblot分析结果表 明，该 目的蛋 白具有 良好反应原性 。将重组 L． 1actis口服免疫 BAIg／c小鼠，小鼠产生特异性 IgG及黏膜 slgA。本试验为进一步研 究仔猪 口服重组 L．1actis疫 苗 ，诱导其产生抗 ETECK88黏膜免疫的同时 ，发挥 L．1actis的益生功能 ，预 防仔猪腹泻奠定 了基础 。 关键词 ：产肠毒素大肠杆菌；FaeG；Lactococcuslactis；口服免疫 中图分类号 ：$852．612 文献标识码 ：A 文章编号 ：1005-4545(2009)11—1415一O4 ExpressionofthefaeGgeneofenterotoxigenicEscherichiacoliK88fimbrial subunitinLactococcuslactisanditsantigenicity LIU Shu—jie·，LIYong—ming ，XU Zi—wei’ ，WANGYi—cheng (1．StateKeyLaboratoryofFood ScienceandTechnology，JiangnanUniversity，Wuxi，Jiangsu214122，China；2．InstituteofAnimal Husbandryand Veterinary Science，Zhejiang Academy of AgriculturalSciences，Hangzhou 3]OO2]．China) Abstract：AccordingtoP”fPr0f0 gP” Escherichiacoli(ETEC)faeG possessingstrongimmunityandadher— encetoF4receptor(F4R)onbrushbordersofpigletsvillousenterocytes，theexpressionvectorofpNZ8148一faeG wasconstructedandtransformedintoL．1actisNZ9000，theFaeG wasexpressedafterinducedwith5ug／Lnisin． Theproteinproductionwasupto10．89V0ofthetotalcellularsolubleprotein．TheWesternblotresultsindicated thattheproteinpossessedreactionogenicity．OralwithrecombinantL．1actisofBALB／cmiceimmunizationshowed F4一specifcsIgA andIgG antibodyresponses．Theseresultsprovideafoundation forfurtherstudyonoralL．1actis NZ9000／8148一FaeGinducingmucosaIimmuneresponseandpreventingdiarrheaofpiglets． Keywords：ETEC；FaeG；L．1actis；oralimmunization * CorrPs0 gauthor，E-mail：xzwfyz@sina．corn 产肠毒素大肠埃希菌 (E r0fo gP”fEsche～ 毒素有效地涂布到小肠上皮细胞表面，引起小肠上 richi