N-乙酰半胱氨酸对支气管哮喘小鼠模型肺脏树突状细胞功能的影响.pdfVIP

年 月第 卷第期 ,, , . 论 著 一乙酰半胱氨酸对支气管哮喘小鼠模型 肺脏树突状细胞功能的影响 朱 蓉 洪永青 白 冲 【摘要】 目的 观察 乙酰半胱氨酸 干预支气管哮喘模型后,其肺脏树突状细胞 表面分子表达的变化及其对 淋巴细胞分化的影响。方法 卵蛋白致敏、激发裸鼠 / 哮喘模型后随机分成对照 组、地塞米松干预 组和干预 组,每组 只。 法 进行检测血清总 、肺泡灌洗液 和肺脏 和 . 特异性转基因小鼠脾脏 淋巴细胞共培养液上清中自细胞介素 和 干扰素水平。结果 、 组血清 水平 低于 组 . 。 、 组 中 低于 组,而水平升高于 组 . 。 、 组肺脏 ;表面分子 、 、 下调。与 组比较,小鼠肺脏 和 淋巴细胞共培养 后, 、 组上清 水平明显降低,水平明显升高.。结论 可以抑制哮喘免 疫应答反应向方向偏移,且它的治疗作用可能是通过肺脏 来实现的。 【关键词】 支气管哮喘;树突状细胞; 乙酰半胱氨酸; 淋巴细胞;细胞因子 【中图分类号】【文献标识码】【文章编号】?~ ? . , ., , , ,. /. ,. ,.. Ⅱ, . .. 一, 一 .. , Ⅱ . , , 一..一 .; ; ; ; , ,: . . 树突状细胞是目前体内功能最强大的抗 少的作用。有充分证据表明,在抗原激发阶段,选择 原递呈细胞,在免疫应答中的独特作用也使其成为 性地去除 可以消除哮喘的主要特征包括气道高 反应性 。近年国内外大量实验研究结果已经证 支气管哮喘疾病发生、发展的重要调节者。 通 过免疫突触与 细胞连接为初始 细胞的活化提 明, 一乙酰半胱氨酸 具有强大的抗氧化和细 供了三个信号抗原识别信号、协同刺激信号、 细 胞保护作用,故可用来治疗许多氧化应激相关疾病, 胞的分化信号 ,在特异性免疫应答中起着不可缺 例如肺纤维化、急性肺损伤、支气管哮喘和慢性阻塞 性肺病等疾病。和支气管哮喘的关系更是研 作者单位:淮安,南京医科大学附属淮安市第一人民医 究的焦点。有人做过研究,可能通过高迁移率 院呼吸病科朱蓉、洪永青 ;第二军医大学附属长海医院呼吸病科 白 冲 族蛋白 及其受体介导的信号转导通路 责任作者:白 冲: . 来参与哮喘气道氧化应激 。还有学者研究体外试. ≯ . 江苏医药 年月第 褥第 期 ,. . 和 淋巴细胞的共培养 在已加入以上 验得出结论:可抑制人体嗜酸细胞功能 。本 肺 的孔中,以 : 比例加入 . 小鼠脾 实验以哮喘模型为对象,直接体内研究对肺 脏 淋巴细胞,加人 肽及, 血清 部 ;表面分子表达及功能变化。 细胞培养液,并使 肽终浓度为/ , 材料与方法 在、条件下共培养 后法测 一 量上清中细胞因子、 一 水平。 、材料 二、方法 .小鼠哮喘模型制作与分组 将 只裸鼠 . 测定血上清液中 的含 / 随机分为组、组和对照组。 按照等方法建立支气管哮喘小鼠模型。 量 解冻各组小鼠血清,法进行检测血清,按照试剂盒说明书步骤进行测定。 .小鼠肺泡灌洗 每组 只小鼠于末次激发后腹腔注射 戊巴比妥钠 . 麻醉、固定, .测定 及上清液中、 一 的含量 共培养 后收集上清,并将 解冻 以上腹切口进入胸腔结扎右下肺叶,然后行气管插 后按照试剂盒说明书步骤分别进行 及上清 管,用 注射器取生理盐水 经气管套管冲洗、 一 测定。 双侧支气管及肺泡,反复注入、回吸 次后得肺泡灌 洗液约 . ,以 / 离心 , 三、统计学处理 数据以均值±标准差 ± 表示,采用 取上清冻存于一 ℃,以备测定白细胞介素 . 软件行 组间单因素方差分析先行方差齐性 、/干扰素 水平。后剪下已结扎的右下 检验均是齐性的 ,. 为差异有统计学意义。 肺叶浸入 %多聚甲醛中固定 ,备病理切片。 .肺组织的处理 每组 只小鼠于末次激发 结 果后摘除眼球取血并分离血清后予开胸全肺切除 一 、各组 及培养液上清中 和并剪碎肺组织、 . 胶原酶Ⅱ在 ℃消化、裂红、 过滤、离心后弃上清,加入 抗体后,予 水平 ℃孵育、离心、过 后,取出数量约 各组小鼠血清总 、 及培养液上清中 、水平差异有统计学意义, . 表 。个 行流式细胞测定 表面 、 、 Ⅱ类分子。剩下 加入 孔板中,每组至 二、各组小鼠肺脏 表面分子 、 、 少有 个孔。 Ⅱ的表达情况 .脾 淋巴细胞的制备 处死 只. 组、组 平均荧光强度均较对 小鼠开腹取脾、磨碎、裂红、过滤、离心后,加入 照组降低 .,组、组 平均. 抗体 后予以孵育、离心、过柱 荧光强度均较对照组降低 .,组、 后加入 孔板中 法同 分离 ,每组至少有 组Ⅱ平均荧光强度均较