地塞米松给药及撤药后糖皮质激素受体的表达.pdf

第 31卷第 21期 第 三 军 医 大 学 学 报 Vo1．3l No．21 2086 2009年 11月 ACTA ACADEMIAE MEDICINAE MILITARIS TERTIAE Nov 2009 论著 文章编号：1000．5404(2009)21．2086．04 地塞米松给药及撤药后糖皮质激素受体的表达 杨 玲，何 威，李 颖，张 斌 (第三军医大学新桥医院皮肤科，重庆400037) 摘 要：目的 观察地塞米松对体外培养人皮肤角质形成细胞——HacaT细胞糖皮质激素受体 (glucocorticoidrecep— tor，GR)o_／和B表达的调节以及撤药后GR 、GRI3基因表达的后续变化，并探讨其临床意义。方法 以含10～moL／L地塞 米松的DMEM(高糖)培养基孵育细胞，48h后换不含地塞米松的培养基继续孵育。在地塞米松给药后24、48h以及撤药 后24、48、72h的不同时相点 ，采用RT—PCR和Westernblot检测 GRa、GRI3的表达变化，采用免疫荧光化学法观察 GR 、 GR3[的细胞 内定位。结果 地塞米松给药后 24、48h，GRcL的mRNA和蛋 白质水平逐渐下降(P0．05)，呈时间依赖性 ， CRI3的mRNA和蛋 白质水平均逐渐上升(P0．05)；撤药后 24、48、72h，GR0【和GR3[的上述变化不同程度地向原有水平 回复。结论 地塞米松下调GR 并上调GR3[，可部分解释持续外用糖皮质激素制剂后出现的激素耐受现象；下调的GR仅 和上调的GRB在地塞米松撤药后呈现向其原有水平恢复的趋势 ，提示临床上外用激素治疗应避免长期使用。 关键词：糖皮质激素；糖皮质激素受体；角质形成细胞；地塞米松 中图法分类号：R394．6；R965；R986 文献标识码：A Expression ofglucocorticoid receptorin HaCaT cellsunder dexamethasone treat— mentorafterwithdrawal YANG Ling，HEWei，LIYing，ZHANG Bin (DepartmentofDemlatology，XinqiaoHospital，ThirdMilitaryMedicalUniversity， Chongqing400037，China) Abstract：Objective Toinvestigatetheexpressionofglucocortieoidreceptor(GR)otandBincultured humankeratinocytes(HaCaTcells)withtreatmentofdexamethasone(Dex)andafterwithdrawa1．Methods ThemRNAandproteinexpressionsofGR andGR8inHaCaTcellsafterthetreatmentofDex(10 mol／L) for24and48handin24，48and72hafterwithdrawalofDexweredetected byreal—timePCR andWestern blotanalysisrespectively．TheintracellulardistributionofGR and B wasexamined byimmunofluoreseence． Results In24 or48hafterDextreatment．theexpressionsofGR仅 atmRNA andproteinlevelswerereduced inatime—dependentmanner(P0．05)，andthoseofGR31wereincreased(P0．05)asshownbyreal—time PCR andWesternblotanalysis．However，in24，48and72hafterwithdrawalofDex，theabovechangesgra— duallyrec