抗苗勒氏管激素（AMH）对离体人卵巢黄素化颗粒细胞干细胞因子（SCF）表达负调控的研究.pdfVIP

第31卷第 l2期Vo1．31，No．12 牛 殖 避 孕 http：／／www．RandC．ca 2011年 12月Dec．2011 Reproduction＆Contraception randc@sippr．stc．sh．ca · 临床 研 究 · 抗苗勒氏管激素(AMH)对离体人卵巢黄素化颗 粒细胞干细胞因子(SCF)表达负调控的研究 胡 蓉 王飞苗 罗 艳 马会明 吴 听 (宁夏 科大学总医院生殖医学中心 ／省部共建教育部乍肯力保持讴点实验审，银川，750004) 【摘要】目的：研究人卵巢黄素化颗粒细胞中抗苗勒氏管激素(AMH)对干细胞因子(SCF)表达的 影响。方法：收集 15例年龄35岁因男方因素行体外受精一胚胎移植(IVF—ET)患者的卵巢颗粒细 胞，经原代培养，加入不同浓度基因重组人抗苗勒氏管激素(rhAMH)，分别于培养的第4目与第6 目采用实时定量PCR(RT．PCR)和免疫组织化学检测空白对照组与各实验~SCFmRNA77蛋白的表 达。结果：RT—PCR和免疫组织化学均证实人卵巢黄素化颗粒细胞在不同浓度rhAMH干预后． SCFmRNA及蛋白的表达显著减少 0．05)，其中15ng／mlrhAMH抑制作用最明显；实验组第4日 与第6日颗粒细胞表达SCFmRNA及蛋 白无明显差异(尸0．05)。结论：AMH可有效抑制人卵巢黄 素化颗粒细胞SCFmRNA及蛋 白的表达。 关键词：抗茁勒 氏管激素 (AMH)；颗粒细胞；丁细胞冈子 (SCF) 中图分类号：R711 文献标识码：A 文章编号：0253—357X(2011)12．0806—05 抗苗勒氏管激素(antiMiillerianhormone，AMH) 胞的生长与分化以及类固醇激素的产生fl。Nilsson 与丁细胞因子(stemcellfactor，SCF)都是卵巢颗粒细 等通过体外培养大鼠卵巢，结果显示AMH町能抑制 胞分泌的重要细胞因子，在始基卵泡池的募集、 卵 了SCF促进卵子生长的作用l5l。结合上述研究的结 母细胞的成熟方面发挥着重要的作用 1『．。AMH是 论，推测 SCF可能是AMH作用于卵子的媒介之 。 目前已知体内唯一的抑制始基卵泡生长的细胞因子， 但 目前关于AMH负性调控SCFmRNA表达的影响 卵巢组织中仅颗粒细胞上表达其特异的II型受体 尚未见报道，因此本研究选择不同浓度的rhAMH l (AMHRII)，其发挥生物学效应的另～条途径主要通 预体外培养的人卵巢黄素化颗粒细胞，观察并分析 过 Smad蛋白影响颗粒细胞 内信号通路 中的重要转 其对 SCFmRNA及蛋白的表达是否有影响。 录因子，进而调控其它细胞因子基因的转录 【。SCF 是卵巢局部较为重要的生长因子，颗粒细胞产生的 1 资料与方法 SCF通过SCF／C—Kit可直接刺激卵细胞及卵泡膜细 1．1 标本来源 1．1．1对象来源 选取 l5例年龄35岁且因男方 本研究为宁夏 自然科学基金(NZ10115)、宁夏 自治区科技攻 关项 日(kF2010．49)、宁夏高等学校科研项 目(2010297)、 因素行IVF—ET的不育患者，均选用长方案超促排卯， 宁夏医科大学 “申博”项 目(201049)．~tl宁夏生殖与遗传 即在月经周期的黄体中期皮下注射长效达菲林(法博 重点实验室开放课题(SY200804) 福益普生)1．25mg进行降调节， 月经周期第3日 通讯作者：胡蓉：Tel：+86 用高纯度卵泡刺激素(FSH．HP)(瑞士默克雪 诺) Email：hr7424@ 126．C,Om 150--450U进行超促排卵，直到至少3个卵泡的直径 Dako公司 。