骨桥蛋白对小鼠胚泡黏附和扩展的影响及其机制.pdfVIP

第 40卷 第 5期 解 剖 学 报 Vo1．40．No．5 · 794· 2009年 1O月 ACTAANAT0MICA SINICA Oct．2009 骨桥蛋白对小鼠胚泡黏附和扩展的影响及其机制 卢瑾文 杨菁 李风和 徐望明 龙文 徐兰萍 苏红 谢青贞 (武汉大学人 民医院生殖医学中心，武汉 430060) [摘要] 目的 探讨骨桥蛋 白(OPN)对小鼠胚泡黏附、扩展的影响及机制。 方法 采用纤维蛋 白铺板微滴 培养法培养胚胎 ，观察并统计重组小 鼠OPN(rmOPN)、OPN抗体及精氨酸一甘氨酸．天冬氨酸多肽 (RGD)对胚泡 的脱 带、黏附和扩展 的影响；采用 24孑L板培养胚胎 ，酶联免疫吸附测定 (ELISA)法检测胚泡培养液基质金属蛋 白酶 2和 9(MMP-2、一9)的浓度 。 结果 不 同浓度 的 OPN组间胚泡 的脱带率、黏附率与对照组相 比无显著性差异 (P 0．05)；但 1．0mg／L和 10．0mg／LOPN组可促进小 鼠胚泡提前扩展 ，72h囊胚扩展率与对照组相 比差异有显著性，10．0 mg／L组 72h的扩展率显著高于 OPN0．1mg／L组(P0．05)。OPN抗体和 RGD均显著抑制胚泡的脱带、黏附和扩展 ，与 对照组相 比，差异有显著性，且随着浓度的增加，抑制作用越明显。OPN促进胚泡分泌MMP-2及 MMP-9，且存在时间 和剂量依赖性。 结论 OPN在体外可通过促进小 鼠胚泡的扩展和分泌 MMP-2、一9来调节小鼠早期胚泡着床 。 [关键词] 骨桥蛋 白；胚胎着床；黏附；扩展；基质金属蛋 白酶；酶联免疫吸附测定法 ；小鼠 [中图分类号] R711．6 [文献标志码] A [DOI] 10．3969／j．issn．0529．1356．2009．05．020 Effectofosteopontinonmouseblastocystadhesionand outgrowth and itsmechanism LUJin—wen，YANGJing，LIFeng-he，XUWang-ming，LONGWen，XULan—ping，SUHong，XIEQing—zhen (CenterforReproductiveMedicine；RenminHospitalofWuhanUniversity，Wuhan 430060，China) [Abstract] 0bjective Toinvestigatetheeffectofosteopontinonmouseblastocystattachmentandoutgrowthinvitroand itsmechanism．M ethods Mouseblastocystswereculturedinmicrodrops，andthecultureplateswereprecoatedwithfibronectin． Blastocystswerecultured invitro inQuinn’smedium containingvariousconcentrationsofrecombinantmouseosteopontin， osteopontinantibodyandRGDpeptide．Thepercentofhatchedblastocysts，blastocystswithadhesionandoutgrowthwerecalculated at24hours，48hours and72hoursafterculture．Inanotherexperiment，blastocystswereculturedin24一wellcultureplate，the concentrationsofmatrixmeta1l0pmteinases(MMP)一2，一9ofculturemediumweredetected