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6·48 · H erald of M edicine Vo l25 No7 Ju ly 2006
靶向 Survivin基因 siRNA 诱导肝癌细胞凋亡的实验
1 2 3
王 颖 ,蔡刚祥 ,吴 亮
( 1. 华中科技大学同济医学院附属同济医院消化内科 ,武汉 430030; 2. 湖北省嘉鱼县人民医院
感染科 , 437200; 3. 华中科技大学同济医学院附属同济医院感染科 ,武汉 430030)
[摘 要 ] 目的 探讨靶向 su rvivin 的 siRNA 转染肝癌细胞阻抑 su rvivin 表达 ,及其对肝癌细胞凋亡 、增殖与细胞
化疗敏感性的影响 。方法 设计合成特异性靶向 su rvivin 的 siRNA 序列 。肝癌细胞株 H ep G 接种于 6孔培养板内,分为
2
( 1 )
5组 :空白对照组 、阴性对照组和低 、中、高浓度转染组 分别给予 50, 100 和 200 nmol ·L siRNA 转染 。作用 36 h后收
( )
集各组细胞 。W e stern b lot法检测各组细胞 survivin蛋白表达情况 ,逆转录 聚合酶链反应 R TPCR 检测 survivin mRNA
( ) ( ) ( )
表达水平 ,流式细胞术检测各组细胞增殖和凋亡指数 , 四氮唑盐 M TT 法检测氟尿嘧啶 5FU 和顺铂 DD P 对各组细
胞的生长抑制率 。结果 各浓度 siRNA 转染组细胞 su rvivin 蛋白和 mRNA 表达有不同程度减弱 。各浓度 siRNA 转染组
( ) ( )
细胞凋亡指数明显高于对照组 P 0. 05 ,高浓度转染组最明显 P 0. 05 。各浓度 siRNA 转染组细胞增殖指数明显低
( ) ( )
于各对照组 P 0. 05 ,高浓度转染组最明显 P 0. 05 。等浓度化疗药物 5FU 和 DD P对各浓度 siRNA 转染组细胞的
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