检测CEA mRNA、CK19 mRNA和端粒酶监测肺癌血液转移的应用价值.pdfVIP

承 德 医 学 院 学 报 VO1．29No．22012 检测CEAmRNA、CK19mRNA和端粒酶监测肺癌血液转移的应用价值 李晓慧。，张淑荣 ，薛承岩 ，杜新生 ，杨林瀛 ，张永强 (1．承德医学院附属医院，河北承德 067000；2．隆化县医院) 【关键词】癌胚抗原；细胞角蛋白；端粒酶；肺癌；血液转移 【中图分类号】R_734．2 【文献标识码IA 文【章编号11004--6879(2012)02-0158-02 肺癌是常见恶性肿瘤之一，转移是肺癌的恶性标志 结果为2例肺结核、2例炎性假瘤、2例肺囊肿和1例间质肺 和主要特征之一，也是导致治疗失败和患者死亡的主要原 炎，3例端粒酶阳性结果分别为肺结核、炎性假瘤、肺囊肿各 因。及时发现和治疗肺癌转移是改善患者预后的有效途 l例；l例肺结核患者三个指标均为阳性，1例炎性假瘤患者 径。至今，对肿瘤转移(尤其是早期转移、血行转移等)的诊 CEAmRNA+端粒酶双阳性。健康组：2例CKl9mRNA 断仍无令人满意的方法。本研究提示，检测癌胚抗原(CEA) 阳性者，未见有意义的检查结果和既往发现。合并非肿瘤组 mRNA、细胞角蛋白19(CK19)mRNA和端粒酶对判定肺 与健康组，合并组CEAmRNA、CK19mRNA、端粒酶的 癌血液转移有较大帮助，报告如下。 假“阳性率”分别为3．2％(3／93)、9．7％(9／93)、3．2％(3／93)。 1资料与方法 表1夕悯血三种标志物检测结果【例(％)】 1．1 临床资料 103例肺癌患者 癌组)，男57例、女46例， 年龄34-77岁；其中，腺癌24例、鳞癌24例、腺鳞癌l9例、大 细胞肺癌l8例、小细胞肺癌18例，I期l8例、Ⅱ期l9例、Ⅲ 期34例、Ⅳ期32例。同期非癌性肺部疾病患者(非肿瘤组)57 与非肿瘤组，健康组比较： 0．01 例，男31例、女26例，年龄33-78岁，包括肺间质肺炎ll例、 支气管扩张1l例、肺结核l2例、肺囊肿l2例、炎性假瘤ll例。 2．2 不同类型肺癌患者外周_~CEAmRNA、CK19mRNA、 所有患者均为我院确诊病例，均经组织病理学检查确诊。另 端粒酶活性检测结果 见表2。不同类型肺癌组问比较：小 选择36例健康志愿者(健康组)作为对照，男20例、女16例， 细胞肺癌患者CEAmRNA阳性率显著低于其它类型肺癌 年龄33-78岁。 (尸0．05)；不同类型肺癌CK19mRNA、端粒酶阳性率比 1．2 标本采集 用含柠檬酸钠抗凝剂的真空管采集静脉 较无显著差异(尸0．05)。 血，充分混匀，4C离心分离提取有核细胞，用预冷的无RNA 表2不同类要蜊嘻患者夕悯血三种标志物检测结果例【(％)】 酶生理盐水充分洗涤有核细胞，一70℃密封保存，用于检测 CEAmRNA、CK19mRNA和端粒酶。 1．3 检测方法 ①应用逆转录一套式一聚合酶链反应 (RT-NP-PCR)检测CEAmRNA和CK19mRNA，引物参 照文南 由上海细胞生物研究所合成，逆转录试剂盒和核 酸标准物(Marker)为德国Promega公司产品，出现188bp 与其它四种类型肺癌比较： o．05 (CEAmRNA)和460bp(CK19mRNA)核酸电泳带为阳性 2．3 不同分期肺癌患者外周_~CEAmRNA、CK19mRNA、 结果。②应用端粒重复序列扩增一杂交一酶联免疫分析技术 端粒酶活性检测结果 见表3。不同分期肺癌组间比较：I (TRAP-H b_ELISA)检测端粒酶活性，试剂盒购 自华美生 期肺癌患者CEAmRNA、CK19mRNA、端粒酶 阳性率 物工程公司，检测孔OD值 ／阴性对照孔OD值2．1为端