[EMIM]Br离子液体增敏分光光度法测定皮革粉中羟脯氨酸含量.pdfVIP

2012年 12月 江苏教育学院学报(自然科学) Dec．，2012 第28卷 第6期 JournalofJiangsuInstituteofEducation(NaturalSciences) Vo1．28 No．6 [EMIM]Br离子液体增敏分光光度法 测定皮革粉中羟脯氨酸含量 方 夏 黄 余 改 (江苏教育学院生命科学与化学学院，江苏南京 210013) [摘 要] 在国标光度法测定羟脯氨酸的体系中，加入离子液体——溴化 1一乙基一3甲基咪唑[EMIM]Br，研究表 明该体系对测定羟脯氨酸具有很好的增敏作用，由此建立了分光光度法测定羟脯氨酸的新体系，并用于皮革奶的检 测．该方法的检 出限是 ：O．45 ml，加标 回收率是 93．4％． [关键词] L一羟脯氨酸； 离子液体； 增敏 【中图分类号] 0657．7 【文献标识码] A 【文章编号] 1671—1696(2012)06—0020—04 当前，食品安全问题越来越引起人们的重视．皮 高效液相色谱法 一J、氨基酸分析仪法、电泳法．比色 革奶 ，就是前不久媒体曝光的食品安全问题之一．它 法和电泳法操作步骤繁琐，影响因素多，准确率差． 通过向牛奶或奶粉中添加皮革水解蛋 白，从而提高 氨基酸分析仪可提供快速、准确高灵敏度的检测方 牛奶含氮量，达到提高其蛋 白质含量检测指标的目 法，但价格昂贵，一般实验室难 以实现．高效液相色 的． 谱法分离效率高．选择性好，检测灵敏度高，操作 自 皮革水解蛋 白粉是利用皮革下脚料甚至动物毛 动化，应用范围广，但分析成本高．液相色谱仪价格 发等物质(类似于又粘又稠半透 明状液体)，经水解 及 日常维护费用贵，分析时间一般较长．而光度法因 而生成的一种粉状物．因所用皮革在经糅制、染色等 其设备简单，操作方便而应用较广，但传统的光度法 人工加工处理过程中要加人重铬酸钠，如果长期食 不足之处是灵敏度不够高，因此，寻找一种高灵敏的 用含有加入 了 “皮革水解蛋白粉”的食物，“铬”重金 光度测定方法很有必要．目前，用光度法测定羟脯氨 属离子便会被人体吸收，积累于骨骼之中，长期积累 酸含量增敏体系的研究还未见报道 ，基于这点，笔者 便会中毒，使人体关节疏松肿大，甚至造成儿童死 查阅大量光度法增敏测定其他物质的研究论文，力 亡，所 以，检测皮革奶就显得尤为重要．目前检测皮 求寻找能增敏光度法测羟脯氨酸的体系．_5J 革奶通常是利用检测乳蛋 白区别于动物蛋 白的一种 一 、 主要试剂和仪器。。 氨基酸——L一羟脯氨酸 (L-Hydroxyproline，Hyp)的存 在与含量来鉴定是否是皮革奶．L．羟脯氨酸是水解 1．试剂 动物蛋 白中特有的氨基酸，它不属于 20种常见氨基 如无特别说明，所用试剂均为分析纯．水为蒸馏 酸，在蛋 白中含量约为 10％，其含量是衡量动物胶原 水或去离子水，或相同浓度的水． 水解蛋白含量的一个重要指标．_1国家质监总局将 (1)硫酸溶液[c|H1 3mol／L] L一羟脯氨酸作为奶粉及乳饮料产品质量专项监督检 量取750mL水于2L的容量瓶中，在搅拌下缓 查的项 目． 慢加入320mL浓硫酸 (密度为 1．84g／mE)．冷却至 目前，已报道的羟脯氨酸测定方法有：比色法、 室温后用水定容． [收稿 日期]2012—09—10 [作者简介]方 夏 (1961