植物组织培养操作技术.pdfVIP

现代农业科技 2012年第 24期 植物组织培养操作技术 崔兴林 秦新惠 (酒泉职业技术学院，甘肃酒泉 735000) 摘要 植物组织培齐的重点在于操作，操作规范与否决定了组培工作的成败 ，该文就溶液配制、培养基制作、灭菌技术、接种及造成污 染的原因进行分析总结，并提出了相应的解决方法，对组培 日常工作起到一定的指导作用。 关键词 植物组织培养 ：技能：操作 中图分类号 Q943．1 文献标识码 B 文章编号 1007—5739(2012)24—0182—02 植物组培快繁技术是生物技术领域 中的一项新技术 ， 否完好 ，加水至瓶 口标准线附近盖好瓶塞 ，将瓶倒立 30S， 也是高科技技术。以前大多停留在实验室阶段 ，如今部分企 观察瓶塞周围是否漏水 ，然后将瓶直立 ，把瓶塞转动 180o后 业已经实行产业化市场运作 ，赢接眼务于经济发展。植物组 再盖紧，倒立，触摸瓶颈，仍不渗水，即可使用。②润洗：用蒸 织培养生产是一个系统工程 ，从一个外植体 (芽 、侧芽 、叶 馏水润洗 3～4次后再用待装溶液润洗 ．以保证定容后溶液 片、茎段 、仡梗 、花托 、根段 、根芽等)～启动培养产生中间繁 的浓度不发生变化 。③定容 ：引流时玻璃棒伸到刻度线 以 殖体一 中间繁殖培养一生恨幼曲培养一试管苗驯化移栽一 下；热溶液应凉至室温后对其进行稀释 ，因为温度升高会使 田间定值 ．这些环节都需要熟练的操作技术 ，才能保证生产 瓶体膨胀 ，致使所量体积不准确 ；用少量蒸馏水冲冼玻璃 计划的按时完成。操作技术主要包括熟练地配制培养基 ，具 棒 、烧杯 3～4次，洗出液全部转入容量瓶中．然后用蒸馏水 备娴熟的接种技术，掌握各种灭菌技术 ，以最大限度地减少 稀释．接近容量瓶标线 1～2em时用胶头滴管进行滴定以防 污染 的发生。操作人员应具备一定的化学知识 ，以对实验 定容失败 ；视线与溶液弯月面最低点恰好相切；容量瓶用完 室基本设备进行 日常管理及维护。 应及时洗涤干净，塞上瓶塞，并在塞子与瓶 口之间夹一条纸 1 溶液配制技术 条，防止瓶塞与瓶 口粘连rlJ。 组培工作中需要配制一定浓度 的培养基母液、灭菌剂 ， 1．2．4 移液管移取母液的移液技巧。制作培养基时需用不 这也是组培工作的首要环节 ，一定要会使用相关的设备仪 同规格的移液管移取不同体积的母液 。分度移液管应从最 器 ，还要懂得各种化学药品性质 ，才能掌握各种药品溶液 的 上面刻度起始往下放出所需体积 ，不能用多少体积就取出 配制技术。 多少体积；管尖插入母液不要太深或太浅；当液面升高到刻 1．1 准备工作 度线以上时，快速移去洗耳球 ，立即用右手食指按住管 口， 在配制药品前 ，要准备相应范围的电子天平 ，仔细核对 将移液管提离液面 ，管尖垂直接触容器内壁，略微放松食指 各种药品，检查与润洗各种玻璃仪器和器皿。 并轻轻转动移液管，直到溶液的弯月面最低点与颈标线恰 1．2 操作要点 好相切为宜 ，待溶液流尽停留 15s：如果移液管上标有 “吹” 1．2．1 电子天平的正确使用及称量。称量前清洁、检查天平 字 ，则最后残留在管 内的液滴必须吹出；使用完移液管 ，清 水平 、调整零点：称量的最大量不得超过天平的最大负荷 ； 洗其内外壁 ，再放 回原处 ；清洗 、移液过程 中溶液不能滴到 具有寓蚀性 的化学药品不得直接放人称盘内；称量值超过 桌面 、地面。 2 培养基制作技术 所需值 用