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中国中医基础医学杂志 2008年第 l4卷第 5期
362 ChineseJoumalofBasicMedicineinTraditionalChineseMedicine 2()o8．Vo1．14．No．5
【实验研究】
人参皂甙 Rb3对 NMDA引起的大鼠海马
神经元钙增加的影响
沈洪妹 卜。，张天一。，姜正林
(1．苏州大学医学院 基础医学系，江苏 苏州 215123；2．南通大学 航海医学研 究所，
江苏 南通 226001；3．江苏省神经再生重点实验室，江苏 南通 226001)
摘要 ：目的：探讨人参皂甙Rb对海马神经元 NMDA受体的影响。方法：对大鼠胚胎脑海马神
经元进行体外培养 ，经 Fluo．3／AM孵育后 ，采用激光共聚焦技术测定神经元 内钙荧光强度 ，计算相
对荧光强度。结果：100gMNMDA能使胞 内钙增加 124±53．9％，同时加不同浓度的人参皂甙Rb后
能降低 NMDA引起的钙增加，其 中300gMRb+100~／MNMDA组与 100~／MNMDA组相 比差异有显著性
意义(P0．01)。结论 ：人参皂甙Rb对 NMDA引起的钙 内流具有抑制作用 ，且这一作用与所用的
剂量有关。
关键词 ：人参皂甙 Rb；N．甲基．D．天门冬氨酸；细胞内游离钙
中图分类号：R285．5 文献标识码：B 文章编号 ：1006．3250(2008)05．0362．02
缺血缺氧性脑损伤机制中，谷氨酸兴奋毒性学 3．0，HEPES10．0，CaC1，3．0，葡萄糖 8．0；HBSS：NaCL
说越来越受到人们的关注。缺血缺氧引起细胞外液 8．4g／L，KCL0．224g／L，HEPES2．38g／L，链霉素 100万
谷氨酸积聚，激活脑 内兴奋性氨基酸受体 ，尤其是谷 IU／L，青霉素 100万 IU／L；DMEM培养基：DMEM粉
氨酸受体，从而造成神经元损伤…。然而，至今还没 剂 1袋 ，NaHCO，3．7g，溶于超 纯 水 至 1O00ml，并含
有一种确实有效而无毒性 的神经保护 剂应用 于临 l0％胎 牛血清。
床。近年来，研究者把 目光投向中药，其中经过深入 1．2 神经元培养
化学、药理研究的人参最受关注。人参皂甙是人参 取 18dSD孕 鼠，乙醚麻醉后在无菌条件下于
的主要生物活性成分，是多种单体的混合，因此人参 HBSS液 中分离双侧海马，置于含 0．125％胰酶 的
皂甙单体 的研 究越来越受到医药学界的重视，并成 HBSS液 中，37℃孵育消化 15min后吹打，以2．0×
为探讨 中药药理机制的典范。本研究发现 ，多种人 l0个细胞／ml的密度接种于预先用多聚赖氨酸包
参皂甙单体 具有神经保护作用，尤其是人参皂甙 被过的玻片上，于37℃、5％CO 培养箱 中培养 24h
Rb具有抗缺血缺氧性脑损伤 的作用，机理与其抗 后半量换无血清培养液 NB，随后每 隔 1周半量换
谷氨酸毒性有关 。J。本实验 旨在这一基础上对人 液，培养第 7天加入终浓度为 IO~／M 的盐酸 阿糖胞
参皂甙Rb 的抗谷氨酸毒性作用机制做进一步研 苷，作用48h，以抑制非神经细胞 的过度繁殖。神经
究 。 细胞培养 2周后用于实验 。
1 材料与方法 1．3 细胞 内游离钙的测量与分组
1．1 材料 将培养 2周 的海马神经元移至含浓度 5M
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