胶体金标记单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体的制备.pdfVIP

中国卫生工程学2009年 10月第 8卷第5期 ChineseJournalollublicHeahhE ·263 · 【论著】 胶体金标记单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体的制备 罗雁非 ，贾芙蓉 ，白翠华 ，孔祥云。，姜永利 ，丁旭 ，‘何成彦 (1．吉林出入境检验检疫局，吉林 长春 130021；2．解放军第208医院； 3．吉林省疾病预防控制中心；4．吉林大学中日联谊医院) 【摘 要】 目的 制备胶体金标记单核细胞增生李斯特菌的单克隆抗体(McAb)，用于检测食品中的致病性 单核细胞增生李斯特菌。方法 以纯化的单核细胞增生李斯特菌(标准菌株号 54001、54002)为抗原，免疫 Balb／c 小鼠，制备单克隆抗体 ，建立胶体金标记的单核细胞增生李斯特菌单克隆抗体的制备方法。结果 筛选出2株单 抗杂交瘤细胞株 F5、 ，并获得免疫球蛋白，测定免疫球蛋白亚类为 IgM。通过选用柠檬酸钠法制备胶体金标记单 核细胞增生李斯特菌抗体，测定其最适蛋白结合浓度为 12g／ml。结论 成功制备了胶体金标记的单核细胞增生 李斯特菌的单克隆抗体，为建立食品中病原性单核细胞增生李斯特菌检测技术奠定基础。 【关键词】 单核细胞增生李斯特菌；单克隆抗体；胶体金 [中图分类号] R155 [文献标识码] A [文章编号) 1671-4199(2009J05-0263-03 Preparation ofMonodonalAntibodiesAgainstListeriaMonocytogenesCoupledwjthColloidalGold LUOYan—fei，J1AFu—rong，BAICui—hua，eta1． JilinEntry—ExitInspectionandQuarantineBureau，Changchun lin 130062．China 【Abstract】OMeetive TopreparemonoclonalantibodiesagainstListeriamonocytogeneswhichwascoupledwithcol— loidal gold ，todetermineListeriamonocytogenesinfood．Methods TheBalb／cmicewereimmunizedwiththepurifiedList— eriamonocytogenesusedasanantigen，monoclonal antibodiesagainstListeriamonocy~ogeneswerepreparedbynormalhybri- domatechnology，thenthecolloidalgold wascoupledtotheListeriamonocytogenesantibodies．Results Theimmuno— globulinIgMwaspreparedandthebestcompatibleproteinconcentrationofthecolloidalgoldwasmeasuredas12 g／ m1．Conclusion Listeriamonocytogenesmonoclonalantibodiescoupledwithcolloidal goldhavebeensuccessfullyobtained， SOitwillbuildastrongbasisforthedetectionofpathogenicIAsteriamonocytogenesinthefuture． 【Keywords】 Listeriamonocytogenes；Monoclonalantibody；Colloidalgold 李斯特菌属 (Listeria)分为2个群，7个种，其 中 威胁，是冷冻食品中威胁人类健康的主要病原菌之 单核细胞增生李斯特菌被认为是引起动物和人类李 一 。 在美国LM被列为4种主要的食源性致死病菌 斯特菌病的主要致病菌。单核细胞增生李斯特菌 之一，已经被 WHO食品安全工作计划列为重点检