呼和浩特地区牛羊布鲁菌流行株种及生物型鉴定.pdfVIP

动物医学进展。2011，32(9)：34—36 ProgressinVeterinaryMedicine 呼和浩特地区牛羊布鲁菌流行株种及生物型鉴定 赵林立 ，唐泰山 ，赵治国 ，王海艳 ，敖威华 ，刘 虹 (1．内蒙古出入境检验检疫局，内蒙古呼和浩特 010020；2．江苏出入境检验检疫局，江苏南京 210001) 摘 要：应用常规细茵学方法，对呼和浩特部分地区疑似布鲁茵病 的牛、羊流产胎儿病料进行了布鲁茵 分离，共分离到4株布鲁菌。进一步根据细茵形态、培养特性、生化特性 以及平板凝集试验等对分离到的细 茵进行种型鉴定。结果表明，其 中3株为羊种布鲁菌生物3型，1株为牛种布鲁茵生物 3型。本研究结果为 内蒙古地 区布鲁茵病的防控奠定了病原学基础 。 关键词：分离；鉴定；羊种布鲁茵生物3型；牛种布鲁茵生物 3型 中图分类号：$852．614 文献标识码 ：A 文章编号：1007-5038(2011)09-0034-03 布 鲁 菌 病 (Brucellosis)是 由布 鲁 菌 属 镜为 日本 Olympus公司产品。 (Brucella)的不 同种布鲁菌 引起人及多种动物共 1．1．3 试剂 布鲁菌琼脂培养基、尿素酶活性试 患的细菌性传染病 ，该病是世界动物卫生组织 (0f— 验、糖发酵试验 、MR试验、VP试验、明胶液化试验、 riceInternationaldesEpizooties，0IE)确定的必须 柠檬酸盐利用试验、硝酸盐还原试验、触酶试验、石 报告的传染病。在家畜中，牛、羊、猪布鲁菌病时有 蕊牛乳试验等所需试剂及细菌生化鉴定管，均为北 发生[1]，给养殖业造成 巨大的经济损失。由于该病 京陆桥技术有限责任公司产 品；布鲁菌 阳性和阴性 可经动物传播给人类，故其在公共卫生学上具有重 血清及A、M、R因子血清均 由内蒙古地方病研究所 要意义 。多年来，我国所采取的以净化为主的综合 馈赠 。 性防控措施取得了一定效果 ，但近年来 ，人畜布鲁菌 1．2 方法 病疫情在部分地区又有回升势头[2]。 1．2．1 选择性培养基的配制 布氏琼脂培养基 ：分 布鲁菌属依据其表型和储存宿主不同分为 6个 别称取胰蛋 白胨 10．0g、蛋 白胨 10．0g、酵母粉 2．0 种 、19个生物型[3]。调查显示 ，我 国主要流行 的布 g、葡萄糖 1．0g、氯化钠 5．0g、亚硫酸氢钠 0．1g，加 鲁菌有马耳他布鲁菌、流产布鲁菌和猪布鲁菌，虽然 入 1000mL蒸馏水 ，加热溶解后调节 PH至7．0，每 不同种具有一定的宿主选择性，但不同动物之间的 100mL培养基中加人放线酮 10mg，万古霉素2500 交叉感染也非常普遍，这给本病 的防控带来 了较大 IU，多黏菌素 600IU，杆菌肽 2500IU。 的困难，因此 ，确定地 区流行菌株的种和生物型，对 1．2．2 细菌的分离培养 无菌取 5头奶牛流产胎 丰富布鲁菌病流行病学资料，查 明感染来源 ，切断传 儿和 3只流产羊胎儿的肝、脾、肺、胎衣，以及母体阴 染途径等均十分重要 。本试验对采集于 内蒙古呼和 道分泌物 ，分别划线接种于双份布鲁菌琼脂培养基 ， 浩特地区牛羊养殖场的疑似布鲁菌病的流产病料， 1份置于普通大气 37℃培养，另 1份置于体积分数 进行了病原分离、鉴定及种型确定，为该地区布鲁菌 为 5 ～l0 的CO。环境 37℃培养 3d，如无菌落生 病的有效防控奠定了重要基础 。 长，则继续培养 7d～15d。取出培养皿，观察菌落 1 材料与方法 生长情况。对可疑菌落涂片并进行革兰染色和改良 1．1 材料 柯氏染色[，显微镜下观察形态，进一步用胰蛋 白胨 1．1．1 病料 从呼和浩特地 区饲养场采集 的5头