发芽咖啡豆α-半乳糖苷酶的化学修饰.pdfVIP

第3O卷第2期 武 汉 工 业 学 院 学 报 V0I．30No．2 2011年6月 Journal of Wuhan Polytechnic University Jun．20ll 文章编号：1009-4881(2011)02-0001-04 DOI：10．3969／j．issn．1009-4881．2011．02．001 发芽咖啡豆 半乳糖苷酶的化学修饰 沈汪洋 ，‘金征宇 (I．武汉工业学院食品科学与工程学院，湖北 武汉 430023； 2．江南大学 食品科学与工程学院，江苏 无锡 214122) 摘 要：从发芽咖啡豆中提取 Ot一半乳糖苷酶，在一定浓度条件下，化学修饰剂对发芽咖啡豆 0一【半乳糖苷酶的化学修饰结果显示：色氨酸是Ot一半乳糖苷酶活性中心的必需氨基酸，一SH、一 COOH和组氨酸对仅．半乳糖苷酶的活性有影响，精氨酸、赖氨酸和一s—S一不是仅一半乳糖苷 酶活性中心的必需基团。邹氏作图法显示仅一半乳糖苷酶活性中心的必需色氨酸数 目为 1。 关键词：发芽咖啡豆；一半乳糖苷酶；化学修饰 中图分类号：TS273 文献标识码：A 、h‘emI●Ca-Imod…it-icat一io‘not·a-qa-lact一osi0da‘se fr·om germin·at一in‘flCOff·e·eb0eaas SHENWang-yang，fiNZheng∥ (1．CollegeofFoodScienceandEngineering，WuhanPolytechnicUniversity，Wuhan430023，China； 2．SchoolofFoodScienceandTechnology，JiangnanUniversity，Wu】i【i214122，China) Abstract：ThechemicalmodificationofNBSresultedinacompletelossof0【·galactosidase(fromgerminatingcoffee beans)activity，suggestingthat wasanessentialaminoacidtotheenzymeactivesite．一SH、一COOHandHis wereinvolvedinit．AndArg，Lysand —S—S— werenotinvolvedinit．ThenumberofhteessentialTrpwasesti- matedasone． Keywords：germinatingcoffeebeans；a-galactosidase；chemicalmodfiication 一 半乳糖苷酶(仅-Galactosidase，d-Gal；EC3．2． 酶活较低，成为此酶进一步应用的瓶颈。2005年， 1．22)是一种外切糖苷酶，可以分解蜜二糖，又称为 Marraccini等 报道在发芽咖啡豆中发现 仅-Gal的 蜜二糖酶。此酶主要水解以具有 Ot一半乳糖苷结构 酶活普遍高于咖啡豆 (绿咖啡豆)来源的 -Gal酶 的碳水化合物，因此又将蜜二糖酶命名为 一半乳糖 活。本实验追踪国外报道，在从发芽咖啡豆中提取、 苷酶…。 一半乳糖苷酶广泛存在于动物、植物及微 分离、纯化得到a．Gal的基础上，深入研究 仪-Gal的 生物中 ]。咖啡豆 一半乳糖苷酶是从咖啡豆中提 化学修饰，找出该酶的活性中心所需的氨基酸种类 取得到的一种 一半乳糖苷酶。由于此酶具有三项 和数 目，为此酶的进一步应用提供理论指导。 显著功能而受到研究者的重视 ：制备环糊精衍生 1 材料与方法 物 3【】，法布里病的临床治疗 ]，血型转换研究(B型 血转换成 O型血)研究 ]。但是利用传统的方法，