出入境体检常用血清学ELISA试剂内部对照的有效性与结果判定.pdfVIP

维普资讯 第 l3卷 第 2期 口岸卫生控制 实验研究 出入境体检常用血清学 ELISA试剂内部对照的 有效性与结果判定 杨志俊 盐城出入境检验检疫局(盐城，224002) 殷竹君 江苏国际旅行卫生保健 中心(南京，210001) 摘要 文章分析 了传染病监测体检项 目常用血清学EUSA试剂 内部对照的有效性与实验结果判 定之 间的关系，尤其是 阳性对照、阴性对照及空白对照与实验结果之 间的关系，提高了血清学检 测的质量 。 关键词 ELISA试剂 内部对照 有效性 结果判定 中图分类号 R一33 文献标识码 B l ELISA试剂内部各种对照的概念 、要求及分类 阳性对照采用 精“选”的含有待检物质的人血清 1．1 阴性对照 制备而成。所谓 “精选”，就是把收集的阳性人血清经 1．1．1 阴性对照的概念与要求 过数种试验进行 “筛试”、把含有 “干扰性物质”的血 在血清免疫学试验中，阴性对照应当与检测血清 清剔除、不用，以避免出现 假“阳性”干扰试验结果。 具有同源性和同质性，不含有待检物质 ，并能客观比 1．2．2 阳性对照设置 较和鉴别影响抗原与抗体反应的因素。阴性对照一般 第一种阳性对照为主要用于评价该项试验结果 用动物血清制品稀释配置或与部分人血清混合配置， 是否有效和试验结果的稳定性与可比性。而所设的 也有的是不含有相应抗原抗体的正常人血清。阴性对 阳性对照的测量值不列入 Cutoff值计算、但是不可 照的个数根据说明书的要求一般是2～3个，最后取平 不做。如 HBsAg、抗一HBs、HBeAg等。 均值NCx，实际上试剂NCx值的波动范围与大量阴性 第二种阳性对照的设置，不仅用于评价试验结 标本实际OD值正态分布范围是一致的。 果是否有效和试验结果的稳定性与可比性，而且计 1．1．2 阴性对照分类 人 Cutoff的计算。此时的Cutoff值的含义是代表该 第一种表示受检人血清中并不含有或方法学灵 标志物在健康 (正常)人群中正常值范围的上限。待 敏度未能检出的待检物的基准水平，并且是临界值 检样本检测值超过该上限(Cutoff)时表示有诊断意 (Cutoff)计算公式中决定 “是”(阳性)、或 “否”(阴性) 义。例如抗一HBe、抗一HBc、抗一HBcIgM等。 的唯一可变值。阴性对照值高，导致假阴性；反之 ，导 1_3 空 白对照 致假阳性。如：HBsAg、HBeAg、抗一HBc等。 仅用稀释液代替检测样本、用以观测最终反应 第二种阴性对照设置，在方法学上要求加入指 的显色 本“底”、并用于酶标仪消除、扣除 “本底”，即： 示性定量标准品，如中和剂HBeAg，定量 HBcAg等， 以本底为 “零”读取阳性、阴性对照孔和样本检测孔 用以检测抗一HBe、抗一HBc。或者选取代表平均水平 的吸光值 (OD)；或者 ，在计算阴性对照均值 (NCx)、 的正常人血清用作阴性对照，如检测抗一HBcIgM。此 阳性对照均值(PCx)、样本读数的S／C．0．值时减去空 类 Cutoff值计算时，多数均包括阴性和阳性对照值 白对照的本底吸光值。空白孔具体如何读取读数，则 2个可变值 。 依照说明书操作。例如，生物梅里埃中国有限公司的 1．2 阳性对照 中文版 《人类免疫缺陷病毒抗原抗体诊断试剂盒 (酶 1．2．1 阳性对照的概念与要求