猪Sirtuin3基因的克隆与进化分析.pdf

江西农业学报 2008，20(12)：1—2 AetaAgrieuhuraeJiangxi 猪 Sirtuin3基因的克隆与进化分析 韩立强，王永才，朱河水，王月影，杨国宇 (河南农业大学牧医工程学院，河南 郑州450002) 摘 要：Ak猪十二指肠肠道组织提取总RNA，采用RT—PCR方法克隆了猪Sirtuin3基因，并与GenBank中的9个其他物 种的核酸序列进行 了同源性分析，采用邻接法构建了分子系统进化树。结果表明克隆的猪 Sirtuln3基因长999bp，编码 332 个氨基酸，前21个为信号肽；猪Sirtuin3与牛、人的同源性最高，分别为86．3％、79．6％，分子进化树也表明猪的Sirtuin3与 牛、人的亲缘关系最近。 关键词：猪；克隆；序列分析；进化树；Sirtuin3基因 中图分类号：Q785 文献标识码：A 文章编号：1001～8581(2008)12—0001—02 MolecularCloningandSequenceAnalysisofPorcineSirtuin3Gene HAN Li—qiaJ1g，WANG Yong—cai，ZHU He—shui，WANG Yue—ying，YANG Guo—yu ‘ (CoUegeofAnimalHusbandryandVeterinarySciences，HenanAgriculturalUniversity，Zhengzhou450002，China) Abstract：TotalRNAwasisolatedfrom porcineduodenal perforationtissue．TheSirtuin3cDNA wasamplifiedbyRT—PCR nad thenclonedandsequenced．Th enucleotidesequeneewascomparedwiththehomologousgenesinotherspeciesretrievedfrom theGen- Bnak，andfinallythephylogenetictreewasconsturctedbyNJmethod．Th eresultsindicatde thattheclonde porcineSirtuin3genewas 999bpinlength，thededucedaminoacidshad332，andthesig=lpeptideofpredictedaminoacidsequenceWas the1—21stamino acid．Homologyanalysisshowedthatthesequenceshared86．3％ nad79．6％ homologywiththoseof COW nadhumanrespectively． Phylogeneticnaalysisbasedonthenucleotidesequencefrom theSirtuin3geneshowedthatpighadacloserphylogenetierelationwith COW andhumna． Keywords：Pig；Molecularcloning；Sequenceanalysis；Phylogeneticnaalysis 阐释寿命调控机制，实现延缓衰老、延长寿命的目的 1．2 试剂与仪器 AMV反转录酶、RNase—Inhibitor、 一 直以来是人们关注的焦点及 自然科学研究的热点。研 Oligo(dT)、TaqDNA聚合酶、DNAMarker、pMD一18T载 究发现，少数几个甚至单个基因的突变即可显著地延长 体、DH5ct感受态细胞等均购 自TaKaRa宝生物工程 (大 酵母、线虫乃至小鼠的寿命”。由此，人们认识到衰老可 连)有限公司；动物组织P~Aout购于绵阳高新区天泽基 能并非如传统观念所认为的那样错综复杂，难以驾驭，它 因工程有限公司。 更可能受控于某几个乃至某一个关键性信息调控机制的 3K30冷冻离心机，购 自德国Sigma公司；紫外凝胶 调节和制约。因此，寻找长寿基因近年来备受关注。在