整块组织HE染色制片优缺点及适用范围.pdfVIP

802。 河北联合大学学报(医学版) 2013年 11月第 l5卷第6期 JournalofHebeiUnitedUniversity(HealthSciences)2013Nov，15(6) 整块组织HE染色制片优缺点及适用范围 蒙兆年 王登科 戴新文 (宁夏师范学院医学院 宁夏固原 756000) [关键词] 整块组织 HE染色 石蜡切片 单片片染 染色结果就不会有太大的误差，正常染色结果应是连续制作出 [中图分类号] R446．8 [文献标识码] A 来的切片着色均匀一致，不易引起染色误差。观察者在观察学 [文章编号] 2095—2694(2013)06—802—02 习同一类型石蜡组织切片时一般不会引起读片误差。由于此染 色法制片比较均匀一致，也可适用于大批量同批次切片染色制 自从 1860年T．EKLEBS介绍了石蜡包埋法，1870年 WHIS 作的需求。整块组织HE染色制片时无论是一般的组织器官或 发明了石蜡组织切片机后，给广大的病理学、组织学、生物学、临 是细胞核相对比较密集的免疫器官，所染组织块的表层及深部 床医学科研等领域的专家带来了极大的便利 J。从而使人们 细胞核着色一般情况下均匀一致。不会使观察者观片时被误 对显微镜下的正常或异常的人体微细组织结构有了更深人、更 导。②切片染色效果不佳时可进行后序弥补染色。制作者在制 细致的观察。目前染料的种类很多，但是制片染色最常用的还 片过程中如果染色掌控不到位，染色效果不理想时，按常规HE 是苏木素一伊红染色法，简称 HE染色法。以往制片时常用的 单片片染制作法就不能对组织进行染色后续弥补。但是在利用 是 HE单片片染制作法，但是在制片的过程中发现这种制作法 整块组织 HE染色制片时，制作者就可以对染色结果进行弥补。 具有一定的弊端和局限性。比如做大批量连续教学切片时如果 如当取材组织块HE染色过深时，制作者可以在 1％盐酸酒精中 染色技术掌握不到位容易导致所取材的组织结构出现差别，导 进行适当脱色，从而降低苏木精的染色效果 ；反之 ，如果制作出 致染色结果不均匀～致；耗费制作者大量的时间及精力，不适宜 来的切片染色较浅时，就可以分别利用碱性染料苏木精染液或 连续制作大批量教学切片等。后来专家们就发明了整块组织 酸性染料伊红染液对染色效果不佳的组织切片进行复染，从而 HE染色制片法，从而改变传统单片片染制作法的弊端。 达到要求，继而保证了切片制作的质量。③制作者制片时节省 1 材料与方法 大量的试剂及时间。常规HE单片片染制作法每次制作出来的 在实验中，整块组织 HE染色制片与传统单片片染制作法 切片数量有限，并且对染液的消耗量也比较多。而整块组织HE 的染液配制方法不同，制片过程中的关键一环主要是进行染液 染色制片就不同。例如一个羊的肝脏组织块正常情况下可以连 的配制，如配制苏木素染液时，将苏木素染色剂 15rag、蒸馏水 续制作上百张组织切片，并且对染液的消耗量也比较少，对大批 40mL、钾明矾600mg、碘酸钠 5rag，然后将4种试剂进行混合后 ， 量石蜡组织切片制作者无疑是一个既省时又省料的双赢选择。 就形成了整块组织 HE染色制片法中的苏木精染液 ，制作者在 2．2 缺点 =!『=)制作技术要求严格，操作不当易引起染色效果不 每次染色时，为了保证染液的质量 ，最好现用现配。新型伊红染 佳。整块组织HE染色制片法对制作者的技术要求 比较严格， 液的配制，伊红R250mg，95％酒精 50mL，蒸馏水50mL，冰醋酸 需要熟练掌握石蜡组织切片制备技术，并且制作者的制片经验 少许。配制过程如下：制作者先将250mg伊红溶液溶于蒸馏水 应该 比较丰富。如果在制作的过程中某一个环节出现一点操作 2mL，溶解后接着将冰醋酸一滴一滴加入其中，在滴冰醋酸的