山楂提取物对脂肪酸合酶的体外抑制作用.pdfVIP

第31卷 第4期 天 津 中 医药 大 学学 报 Vo1．31 No．4 2012年 12月 JournalofTianjinUniversityofTraditionalChineseMedicine Dec．2012 山楂提取物对脂肪酸合酶的体外抑制作用冰 王 鹏，高敏艳，高 岚，肖学风 摘要：[目的】研究山楂提取物对脂肪酸合酶(rAs)的体外抑制作用，并初步探索抑制作用机制。方【法】采用紫 外一分光光度法，通过监测340nm下还原型辅酶 Ⅱ(NADPH)吸光度值的变化，测定 FAS全反应及不同反应中心的 活性，研究不同剂量山楂醇提物和水提物对FAS体外抑制作用。瞄果】山楂水提物给药浓度为 100 g／mL时，酶剩 余活性为34．2％，醇提物给药浓度达到150 咖 L时，仍剩余 64．2％的酶活性。两者都作用于FAS结构域中的酮酰 还原域(KR)和烯酰还原域(ER)，并且这两个结构域是山楂醇提物抑制FAS的重要作用位点。[结论】山楂提取物对 FAS存在抑制作用。 关键词：脂肪酸合酶；山楂；醇提物；水提物；抑制作用 ；抑制机制 中图分类号：R285．5 文献标识码 ：A 文章编号：1673—9043(2012)04—0229—40 脂肪酸合酶 (FAS)在脂肪酸合成 中居核心地 究降脂 良方血脂灵片对脂肪酸合酶的体外抑制作 位，是脂肪酸合成的关键酶lJ【，其活性高低对体内能 用时，利用血脂灵片中山楂的提取工艺对山楂进行 量物质的代谢等有着重要作用嘲。动物的FAS是由 提取，考察了山楂提取物对 FAS的抑制作用 ，并初 2条完全相同的多肽链(亚基)首尾相连组成的二聚 步探讨了其抑制机制，旨在为研究人员筛选FAS抑 体 ，每条肽链相对分子量为 2．5kD，含有 7种酶活 制剂提供一定的参考。 性，属于多功能酶。人FAS的各种酶活性均与其他 1 仪器与试药 动物的FAS活性相当。 1．1 仪器 旋转蒸发仪 (上海亚荣生化仪器厂)； 在动物体内，除了哺乳期的乳腺和周期性的子 ZK一82A型真空干燥箱 (上海市实验仪器总厂)；十 宫内膜外 ，FAS在几乎所有的正常组织中都只是低 万分之一电子天平(瑞士MettlerToledo公司)；UV一 水平的表达嘲。而众多文献表明，肿瘤细胞 内FAS表 2401PC型紫外分光光度计 (日本岛津公司)。 达增高，脂肪酸合成代谢明显增强，FAS在肿瘤细胞 1．2 试药 山楂 (购 自河北省安国市神禾中药材饮 中对细胞生存的作用远大于在正常细胞中的作用， 片有限责任公司，批号。乙酰辅酶 A 且FAS表达强度与肿瘤的恶性程度密切相关 。另 (AcCoA)、丙二酰辅酶A(MalCoA)、乙酰乙酰辅酶A 外，动物的体脂沉积与FAS蛋白的多寡 、活性的高 (AeAcCoA)、还原型辅酶 Ⅱ(NADPH)、二硫代苏糖 低有重要关系网，提示 FAS可能成为治疗癌症和肥 醇(DIT)、丁烯酸乙酯购 自SIGMA公司；KH2PO、 胖等疾病的靶标，因此寻找低毒高效的FAS抑制剂 K：HPO、EDTA—Na等均为分析纯。FAS由新鲜鸭 具有重要意义。目前研究较多的FAS抑制剂浅蓝菌 肝中分离提纯，其制备和存储采用Tian等报道的方 素和C75均有各 自的缺点 ，研究人员已经将 目光 法㈣，制得的FAS活力约为4．51xl06U／mL 投向了中国的传统中药。山楂作为使用频率很高的 2 方法 一 种中药材 ，广泛应用于各种抗癌 、减肥、降脂复 2．1 山楂提取物的制备 取山楂 100g，用 l000mL 方。已有文献 报道其提取物具有一定的FAS抑制 70％乙醇加热回流提取 2次，第 1次 3h，第 2