不同缺氧状态对人肝癌HepG2细胞侵袭和转移能力的影响.pdfVIP

中国病理生理杂志 ChineseJournalofPathophysiology 2012，28(2)：281—286 · 281 · [文章编号] 1000—4718(2012)02-0281—06 不同缺氧状态对人肝癌 HepG2细胞 侵袭和转移能力的影响 余桂芳 ，严跃红 ，王瑞鑫 ，曾文铤 ，朱科伦 (广州医学院第五附属医院内一科 ，广东 广州 510700；广州医学院第一附属医院肝病研究室，广东 广州510120) [摘 要] 目的：探讨不同缺氧状态对人肝癌 HepG2细胞黏附、侵袭和转移能力的影响及其可能机制。 方法：不同浓度的低氧处理对数生长期的人肝癌HepG2细胞，采用MTr法、Transwell膜侵袭系统、免疫细胞化学 方法 、明胶酶谱分析和反转录PCR检测变异型白细胞分化抗原 CD44v6、基质金属蛋白酶2(MMP一2)、MMP一9、低 氧诱导因子(HIF—la)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达差异。结果：HepG2细胞经低氧处理后 ，细胞的基质黏 附率 、穿透基底膜与游走迁移的细胞数均增高，以3％氧浓度最为显著(P0．05)；3％和5％氧处理还可显著促进 CD44v6的表达，增加MMP一2和MMP一9的表达，并可上调 HIF—lot和VEGF。结论：适度缺氧能增强人肝癌细 胞的黏附、侵袭和转移能力 ，其机制可能与 CD44v6、基质金属蛋白酶、HIF—lot和VEGF的表达改变有关。 [关键词] 肝肿瘤 ；HepG2细胞 ；缺氧；黏附；肿瘤侵袭 [中图分类号] R73—37 [文献标志码] A doi：10．3969／j．issn．1000—4718．2012．02．017 Effectsofhypoxiain differentdegreesoninvitroinvasionandmigration ofhumanhepatocarcinomaHepG2cells YU Gui—fang ，YAN Yue—hong ，WANG Rui—xin ，ZENG Wen—ting ，ZHU Ke— lun2 ( FirstDepartmentofInternalMedicine， AffiliatedHospitalof GnangzhouMedcialCollege，Guangzhou 510700，China；InstituteofHepatology，TheFimtAffiliatedHospitalofGuangzhouMedicalCollege，Guangzhou510120， China．E—mail：yugufiang2004@163．con) [ABSTRACT] AIM：Tostudytheeffectsandtheunderlyingmechanismsofhypoxiaonadhesion，invasionand migrationofHepG2humanlivercancercellscultured invitro．METHODS：HepG2cellswereculturedunderdifferent concentrationsofoxygenfor24 h．MrItI’assaywasusedtomeasurethecelladhesionrate．TheTranswellchamberswere usedtoassessinvitroinvasionandmirgation．TheexpressionofCD44v6，matrixmetalloproteinase2(MMP一2)，MMP一 9，hypoxia—induciblefactor一1(HIF—lot)andvascularendothelialgrowthfactor(VEGF)wasdetectedbythemethods ofimmunocytochemistry，gelatinzymographynadRT—PCR．RESULTS：Hypoxia，especiallyunder3％ oxygen，signifi- cantlyenhancedtheadhesionratesofHepG2ce