传染性支气管炎病毒的分离及其S1基因高变区Ⅰ的遗传变异性分析.pdfVIP

维普资讯 一 2一 养禽与禽病防治 2007年第2期 摘 要：应用鸡胚尿囊腔接种的方法，从广西某一鸡场两群分别为48日 龄和7日龄疑患传染性支气管炎的鸡中分离到两株传染性支气管炎病毒 (IBV)(分别命名为GX—NN1和GX—NN2)；利用反转录一聚合酶链式反 应技术对分离株 s1基因高变区I(HVRI)进行扩增并测定其核苷酸序 列，以分析分离株遗传变异的情况。结果表明，两个分离毒株 HVRI核苷 传染性支气管炎病毒的分离及其 酸之间的同源性仅为76．3％，分离毒株与参考毒株的同源性在69．3％一 99．1％之间；其中分离株GX—NN2与疫苗株 H H Ma5、IM1和标准株 M41、Beaudette的同源性比较高(95．6％ 99．1％)，同属一个分支；而分离 中图分类号：∽∞l3 文献标识码： 文章编号：_00∞-384．7一00．7一(12_n00_ll 基因高变区H的遗传变异性分析 株GX—NN1则与这些参考毒株的同源性比较低 (74．6％一75．4％)，独 自成 为另一个分支。本研究的结果提示，广西养鸡业现场流行的IBV毒株已 经发生了变异。 关键词：传染性支气管炎病毒 分离株 s1基因高变区I 遗传变异性 分析 鸡传染性支气管炎 (Infectiousbronchitis，IB)是由传染性支气管炎病毒(infec— tiousbronchitisvirus。IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触传染性呼吸道疾病，是国 际兽疫局 (OIE)及我国规定的家禽B类 ／-类传染病之一，也是至今严重危害我国 养禽业最重要的疫病之一。由于 IBV血清型众多，各血清型 IBV之间仅有部分或 完全没有交叉保护作用，变异株又不断出现，因此免疫鸡群也会暴发疾病。 IBV属冠状病毒科 (Coronaviridae)，基因组为线性单链正股 RNA，全长约 27．6kb，有j个主要结构蛋白，即纤突(S)蛋白、膜(M)蛋白、核衣壳 (N)蛋白。S蛋白 由s1和 s2两个糖蛋白组成，其中s1蛋白含有与病毒中和、血凝抑制抗体 、细胞吸 附、组织亲和性 、毒力 、血清型特异性的抗原位点 ，也是 IBV蛋白中变异程度最大 的结构蛋白。s1基因5端起始密码后第 159—444nt处存在一个高变区(HVR)，在 HVR内第330357nt处又存在一个所谓的相对保守处，因而将 HVR分隔为上游 的HVRI和下游的HVRII。那些遗传起源接近而血清型不同的毒株大多可从 HVR区编码的抗原簇表位的差异得到反映；Wang等甚至认为仅根据 HVRI的序 列分析或RFLP分析就可以对大多数不同的IBV毒株进行基因分型。 广西南宁市某公司送检的两群发病鸡 (7日龄的良凤黄鸡和48日龄的良凤花 鸡)，临床表现为严重的呼吸罗音 ，剖解病变为气管出血 、有黏液，临床诊断疑为 IBV感染。两群鸡均曾在 1日龄时用商品弱毒疫苗 Ma5株免疫过。对疑似病鸡群 进行剖检，无菌采集病鸡肾、气管、支气管作为病料进行了本研究。 1 材料与方法 1．1病料 分别从7日龄和48日龄两群疑似IBV发病鸡群中采集肾、气管、支气 管组织作为鉴定病料。