肿瘤相关钙信号传导蛋白-2基因对乳腺癌细胞转移能力的影响.pdfVIP

中国基层医药2011年8月第18卷箍 l5期 hi ! !!： ： ： · 2017 · · 论 著 · 肿瘤相关钙信号传导蛋白一2基因对乳腺癌 细胞转移能力的影响 俞 力 范 钰 邱志远 周永静 龚丹丹 肖秀娣 武正炎 摘【要】 目的 探讨TROP-2基因小干扰RNA(siRNA)对乳腺癌细胞黏附和侵袭力的影响。方法 培 养人乳腺癌Bcap-37、LCCI、MCF-7、MDA-MB-231、MDAM·B-435、MDA—MB-468及 ZR75-1细胞株 ，以荧光实时 定量PCR方法检测TROP-2基因mRNA表达；筛选出TROP-2表达最高者。采用TROP-2基因小干扰RNA转 染乳腺癌细胞 ，分别 以荧光实时定量 RT．PCR和免疫荧光方法观察 TROP-2基因mRNA和蛋白水平，然后以 四唑蓝(M1’r)比色法检测细胞黏附性，以TransweH方法检测癌细胞侵袭能力。结果 7株乳腺癌细胞中， TROP-2均有不同程度的表达，以MCF-7细胞最高；以TROP-2siRNA转染乳腺癌 MCF-7细胞后，癌细胞 TROP-2基因mRNA和蛋白水平明显下降，且呈浓度依赖性 ；黏附试验结果显示，5、1O、20nMsiRNA组黏附率 分别为 (52．9±2．5)％、(25．6±2．3)％、(12．8-42．2)％(P0．01)；TransweU试验结果显示 ，5、10和20nM siRNA组穿过滤膜的细胞分别为(78±17)、(39-415)、(19±16)，而对照组分别为(136±25)、(139±21) (P0．01)。结论 TROP-2基因在乳腺癌细胞黏附和侵袭中发挥着重要作用；以siRNA转染乳腺癌细胞，可 抑制乳腺癌细胞黏附和侵袭能力。 【关键词】 乳腺肿瘤；肿瘤相关钙信号传导蛋白-2 Inn1l蚰ceofTROP-2geneontheabilityofhumanbreastcancercellmetastasis ，FANYu，Q Zhi-yuan， ZHOUy0 ng，GONGDan-dan，XIAOXiu-di，WUZheng-yan．LaboratoryofmolecularEndocrinology，TheAffiliated HospitalJiangsuUnivemity，Zhenjiang，fiangsu212001China Correspondingauthor：FANYu，Entail：zjfang36@gmail．corn A【bstract】 Objective Tostudytheeffectsoftumora·ssociatedcalciumsignaltransducer-2(TROP-2)gene smallinterferingRNA(siRNA)onadhesionandinvasionofhumanbreastcancercel1．Methods RealtimePCRwas usedtoevaluatetheTROP-2mRNA of sevenhumanbreastcancercelllinesBcap·37，LCC1，MCF-7，MDA-MB-231， MDA·MB-435，MDA-MB-468，nadZR75-1．ThecelllineofTROP-2highestexpressionwas transfectedwithdifferent doseofTROP-2siRNA．TheexpressionofTROP-2mRNA andproteinweredeterminedbyReal-timequantitativePCR nadimmumoflurescencemehtod．Th ecelladhesionwas evaluatedbyMTrassay，andinvasionwasexminedbyboyden chamber，respectively．Results CelllineMCF-7 showedthehighestelevationofTROP-2mRNA in sevenbreast cnacercelllines．Th eresultsfrom real—timequantitmivePCR andimmumofluresceneemethod showedthatTROP-2