HPK1在缺血性脑损伤中的作用.pdfVIP

徐州医学院学报 ACTA AcADEMIAE MEDIcINAE xUzH0U 2o09，29(3) ·141· HPK1在缺血性脑损伤 中的作用 李婷，张光毅 (徐州医学院生物化学与分子生物学研究中心、江苏省脑病生物信息重点实验室，江苏 徐州 221o02) 摘要：目的 观察HPK1对sD大鼠全脑缺血／再灌注后海马cA1区锥体细胞的作用。方法 采用四动脉结 扎法建立大鼠全脑缺血模型，缺血 15min后分别灌注30min、3h、6h、24h、3天和5天。大鼠随机分为假手术组、 缺血／再灌注组、缺血／再灌注给药组和缺血／再灌注溶剂对照组。缺血／再灌注给药组再分为2组，分别脑室注射 10o L的HPK1As一0DNs、HPK1Ms一0DNs，每24h注射 1次，连续3天，在最后一次注射24h后行四动脉结 扎全脑缺血。使用免疫沉淀和焦油紫染色法等技术检测相关信号蛋白的表达、活化水平及神经元细胞的死亡。 结果 在大鼠海马神经元中有HPK1的表达，脑室注射As一0DNs大鼠海马cA1区存活锥体细胞明显增多。结 论 HPK1反义寡核苷酸对缺血／再灌注引起的海马神经元凋亡具有保护作用。 关键词：造血祖细胞激酶 l；反义寡核苷酸；海马；凋亡 ；大鼠 中图分类号：R364．12；G593 ．2 文献标志码：A 文章编号：1o0o一2065(2009)03—0141一o3 TheroleofHPK1inischemicbraininjury LITing，ZHANG Guangyi (Researchcenterf0rBiochemistryandMolecularBiology，Jiang8uKeyLaboratory0fBrainDisease BioirIf0丌Tlation，XuzhouMedicalCollege，Xuzh0u，Jiangsu221002，China) Abstract：objective Toinvestigatether(1leofHPK1inthepyramidalcellsincAlregionoftherathippocampus afterbrainischemia／reperfusion．Meth0ds Transientbrainischemia(15min)andreperfusi0nwasinducedbythef0ur — vesselocclusionmethod(4一VO)toestablishratbminischemiamode1，f0llowedbyrepeIfusion0fOmin，30min， 3h，6h，24h，3dand5d，respectiveIy．RatswererandomIyassignedto4gr0ups：sham 一0peI_ationgr0up，ischemia／／ repeIfusi0ngmup，dnlgtesgmupandvehic1econtr0lgr0up．Thledrugtestgmupwasil1jectedwith1o0g／LHPK1AS一 0DNs，MS一0DNsinto出ecerebralventc1e，every24hf0r3days，and24h erfhe naladministrationwassubec— tedto4一V0．Immun叩recipjtationandcresy1fastvi0letstainingwereemployedtodetecIfheexpression0frelevantmes— sagepr0teins，activationandthedeathofthehipp0caIIlpalneumns．Results Itwasf0undthatHPKlwasexpressedin mthippocampusneumns．Condusi0Ils AdministrationofHPKlantisenseolig0de0xynuc1eotidesc