内毒素血症小鼠肺组织损伤及血清炎症因子变化的研究.pdfVIP

宁夏医科大学学报 第32卷 8期 · 852 · JournalofNingxiaMedicalUniversity 2010年 11月 文章编号 ：1674—6309(2010)08—0852—04 · 论著 · 内毒素血症小 鼠肺组织损伤及血清炎症 因子变化 的研究 梁锦屏 ， 王琳琳 ， 黄 菱 ， 郭凤英 ， 周 娅 (1．宁夏医科大学基础医学院病原生物学与免疫学系，银川 750004； 2．宁夏医科大学附属医院中心实验室，银川 750040) 摘要：目的 建立内毒素血症小鼠模型，观察模型小鼠肺损伤指标及血清炎症因子的变化，以用于抗 内毒素 药物研究。方法 BALB／c小鼠分为正常对照组 、LPS模型组 ，每组再分为2、6、12、24h四个时间点组，每组 10只。LPS7mg·kg 尾静脉注射建立内毒素血症小鼠模型，记录一般状况 、肉眼及光镜观察肺组织的病理 变化；检测肺水含量；放免法检测血清TNF一 含量；硝酸还原酶法检测 清NO含量。结果 内毒素肺损伤 模型组小鼠在给予LPS后30rain即有症状出现，至24h未见缓解 ；肉眼与光镜观察肺脏病理改变，发现6h起 肺脏病理改变明显可见并逐渐加重 ，延至24h亦未见减轻；模型鼠肺组织 W／D值显著升高；血清 TNF— 和 NO值均在给予LPS后2h即显著升高，并分别在6h和 12h达到高峰，直至24h仍明显高于正常对照组(P 0．01)。结论 尾静脉注射 LPS7mg·kg 可建立较为理想的急性肺损伤动物模型；炎症介质的失控性表达 是内毒素引起急性肺损伤的重要机制之一。 关键词：内毒素；急性肺损伤；TNF— ；NO 中图分类号：R373．1 文献标识码：A 急性肺损伤 (acutelunginjury，ALI)是临床上 司产品；小 鼠碘 [125I]一肿瘤坏死 因子 (TNF一仅) 一 种常见的危重病症，也是全身炎症反应综合征 放射免疫分析药盒购 自北京科美东雅生物技术有 (Systemicinflammatoryresponsesyndrome，SIRS) 限公司(批；小 鼠NO检测试剂盒购 自 时最早出现的器官损伤，可进一步发展为急性呼吸 南京建成生物工程技术有限公司。 窘迫综合征(acuterespiratorydistresssyndro—me，1．1．2 主要仪器 旋涡混合器 (上海第一医学仪 ARDS)。SIRS／ARDS发病机制复杂，病死率高，治 器厂XW 一80型)，自动石蜡包埋机 (常州市中威 疗棘手困难 ，已成为医学领域的攻关难题 ¨I2。内 电子仪器厂)，全 自动组织浸蜡脱水机、切片机(德 毒素(endotoxin)是革兰阴性菌细胞壁外膜 的脂多 国LEICATP1020)，放射免疫计数仪 (中国科学 糖(1ipopolysacchade，LPS)成分，是引起Au 的重 技术大学科技实业总公司 GC一1200)，分光光度计 要因素之一。LPS进入体内后，除本身对肺血管 内 (美国VarianDMS200)。 皮的损伤作用外，可激活血小板、中性粒细胞、巨噬 1．1．3 动物 BALB／c小鼠，6～8周龄 ，18～22g， 细胞以及补体系统和凝血系统等，促使 内源性介质 雌雄各半，宁夏医科大学动物实验中心提供，动物 释放和炎症 因子 的过度分泌 ，造成肺 组织 的损 许可证号 ：SCXK(宁)2005—0001。 伤 j。本文拟采用尾静脉注射 LPS制备小鼠内毒 1．2 方法 素血症模型，观察肺组织病理变化及血清炎症因子 1．2．1 动物模型制备与分组 BALB／c小 鼠80 TNF— 和NO的动态变化，为抗内毒素药物疗效 只，随机分为：①正常对照组：尾静脉注射生理盐水 的研究提供实验数据。 0．1mL ·10g～；② 内毒素肺损伤模型组：尾静脉注 1 材料与方法 射LPS7mg·kg