树状串联hTERT表位肽负载mDC疫苗体外激发抗瘤免疫应答的效应研究.pdfVIP

免疫学杂志 2011年 6月 第 27卷 第6期 IMMUNOLOGICALJOURNALVo1．27 No．6 Jun，201l ·475 · · 论 著 · [文章编号】l0HDo-886l(2011}06--0475-06 树状串联hTERT表位肽负载mDC疫苗体外激发抗瘤免疫应答的效应 研究 钮柏琳 ，慎华平△，杜慧敏 ，杨仕明，邹利全 ，龚建平 f摘 要】目的 通过树状串联hTERT表位肽的髓样树突状细胞(mDC)递呈，刺激同源淋巴细胞，探索一种更优的肿瘤免疫 治疗方法。方法 人_T固相合成4分支的树状串联hTERT表位肽fMAP)及其各分支单肽，免疫荧光检测hTERT的表达情况，免 疫磁珠分选mDC，尼龙毛柱纯化T细胞 ，ELISA检测mDC的IL一12p70和淋巴细胞的(LC)TNF一0、【IFN一 分泌量，流式细胞技术检 测mDC、LC的相关表面分子以及效应性T细胞对 HLA—A2型肿瘤A549、MDA—MB一231和SW480的杀伤率，并作统计学分析。 结果 所有肿瘤细胞都表达hTERT，且胞核大于胞浆；MAP和混合单肽对 3种肿瘤细胞都有杀伤效应 ，且MAP的杀伤效应大于 混合单肽，有统计学差异。结论 人工合成hTERT的MAP肽通过mDC能足够强的激活同源淋巴细胞，在肿瘤疫苗的研发中有 重要意义 。 f关键词】表位肽；髓样树突状细胞；磁珠分选；肿瘤；免疫治疗 中『图分类号】R392 文【献标识码】A EffectsofspecificlymphocytesactivatedbymDC loadedwith tandem multiple antigenicpeptideofhTERT epitopesonanti-tumorcells NIUBolin，SHENHuaping，DUHuimin，YANGShiming，ZHOUliquan，GONGJianping SecondAffiliatedHospitalofChongqingMedical University,DepartmentofHepatobdiarySurgery,Chongqing 400010,China A【bstract]Humantelomerasereversetranscriptase (hTERT)is，recentlydiscovered，acloselyrelateden— zymesoftumorsinunlimitedproliferation，whichhighlyexpressinmosttumortissue，butweaklypositiveornega— tiveinnormaltissues．PreviousstudieshavefoundthatinhibitionofhTERT activityofcellscaninhibitthegrowth oftumorcellsuntildeath，andusinghTERTepitopepeptidetostimulatedendriticcells (DC)caneffectivelyacti— vateanti—tumorimmuneresponseinvitro．Butfurtherstudyresultsshowed thatsingle—epitopesynthetichTERT peptidesalthoughcanmadeeffectiveantitumoreffectsinvitro，therewasnosignificantinvivo．Thisstudytaking advantageofsyntheticmulti—epitopeofhTERT (treeseriesmultipleantigenpeptideantigenTandem-MA whichcontentthreesimplepeptidesI540，V461andL766)loadedautologousmDC (myeloiddendriticcells)toac— tivatethehomologousT—lymphcell，andthendetectthekillingeffectonHLA-A2tmnorcellsA549，MDA—MB一 231andSW 一480byflow cytometry．Resultshowedthattandem—MAPgroupha