汉坦病毒G2囊膜蛋白基因的克隆及其免疫原性的初步研究.pdfVIP

维普资讯 · 548 · ChinJDisControlPrey 2004 Dec；8(6 汉坦病毒G2囊膜蛋白基因的克隆及其免疫原性的初步研究 黄汉菊，吴志洪，王小红 摘【要】 目的 构建汉坦病毒G2囊膜蛋白基因真核表达载体，进一步研究其免疫效果。方法 采用 PCR方法扩增出G2基因，亚克隆于pcDNA3．1／HisB载体 ，重组阳性克隆进行酶切和测序鉴 定。将重组质粒免疫 BAL．B／C小鼠，用间接免疫荧光法(IFA)检测免疫小 鼠血清中抗汉坦病毒 76--118株的交叉抗体。结果 5只免疫小鼠血清中均检测到特异性的抗汉坦病毒 76～118株的 交叉抗体，与对照组相比有显著性差异，其滴度为 1：10．99。结论 G2囊膜蛋 白基因构建成功并 能刺激机体产生特异性抗体 ，但其效价不高，该研究结果为研制有效的HFRS核酸疫苗奠定一定 的实验基础。 关【键词】汉坦病毒；基因 【中图分类号】R373．9 文【献标识码】A 文【章编号】10o8—6013(2004)06—0548—03 StudyonthecloningofhantanvirusglycoproteinG2geneanditsimmunogenicity HUANGHan—ju． WU Zhi—hong，WANG Xiao-hong． DepartmentofPathogeneticBiology．SchoolofBasicMedical Sciences，TongiMdeicalCollege，HuazhongUniversityofScienceandTechnology，Wuhan 430030， hC ina A【bstract】Objective ToconstructtheeukaryoticexpressionvectorofG2geneofhantavirusenvelope glycoproteinandtostudyitsimmunizationeffcet．Methods TheG2genewasamplifiedbyPCR and clonedintotheeukaryoticexpressionvcetorpcDNA3．1／FfisB，verifiedtherecombinantwith restriction endonucleaseand8equenced．TheBALB／Cmicewereimmunizedwiththisplasmidandtheanti—HrNV 76～ l18straincross-antibodiesweredetcetedby IFA．Results Cross-natibodiesagainsthantavims couldbetestde inthesem oftheimmunizde mice，nadthetiterswere1：10．99，whichshowde signifi— cantlvdifferencew．iththecontro1．Conclusions TheresultssuggestthatthefusiongenepcDNA3．1／ HisB-G2issuccessivelvconstmctde anditcandircetlystimulateBALB／Cmicetoproducespecifichu— moralimmunity．butthetitersrenotveryhigh．Thisstudyprovides na experimentalbasisforthefu— tureresearchofefficientDNA vaccineforHFR‘S． K【ey