IDO基因转染小鼠树突状细胞体外诱导Treg细胞增殖的研究.pdfVIP

重庆医学2011年 7月第 40卷第20期 1977 · 论 著 · IDO基因转染小鼠树突状细胞体外诱导 Treg细胞增殖的研究 谢启超 ，朱 波，陈正堂△ (第三军医大学新桥医院全军肿瘤研究所 ，重庆 400037) 摘 要：目的 调节性T细胞(Treg)在肿瘤局部免疫耐受中发挥 了重要作用，但其产生机制 尚不清楚。本实验通过将吲哚 胺一2，3一双加氧酶 (IDO)基 因转染小鼠树 突状细胞 (DC)，体外研 究对 Treg细胞 的诱导增殖作用 ，为肺癌免疫耐受产生机制研 究提 供新的依据 。方法 采用慢病毒转染技术，将含人全长 ID0基 因转染到小鼠DC细胞 ，G418筛选获得 ID0一DC细胞 ，同时设置空 白对照组(DC细胞)及空质粒转染组(EGFP—DC细胞)，将 3种细胞分别与小鼠T淋巴细胞混合培养，利用流式细胞技术分析 3种 细胞对 Treg细胞的诱导增殖作用。结果 ID0基 因成功转染到小鼠DC细胞，与小鼠T淋巴细胞共培养后 ，Treg细胞增殖明 显 ，和 EGFP—DC细胞 (7．5 vs3．6 ，P0．05)及 DC细胞 (7．5 vs3．1 ，P0．05)相 比差异显著 。结论 ID0基 因转染小 鼠DC细胞在体外能明显增强 Treg细胞 的增殖 ，为肺癌局部免疫耐受机制研 究提供 了新的实验依据 。 关键词 ：吲哚胺一2，3一双加氧酶 ；树 突细胞 ；肺肿瘤；免疫耐受；调节性 T细胞 doi：10．3969／j．issn．1671-8348．2011．20．001 文献标识码 ：A 文章编号 ：1671-8348(2011)20—1977一O2 InvitroproliferationofregulatoryTcellinducedbymousedendriticcelltransfectedwith IDO gene XieQichao，ZhuBo，ChenZhengtang (T PInstituteofCancerResearchofPeoplesLiberationArmy，theAffiliatedXinqiaoHospital0厂T rd M ilitaryMedicalUniversity，Chongqing 400037，China) Abstract：Objective RegulatoryT(Treg)cellsplaytheimportantroleintheimmunetoleranceofcancer．Butthemechanism is stillnotclear．Theaim ofthisstudywastoinvestigatetheeffectsofmouseDC celltransfectedwithIDO geneoninducingthepro— liferationofTregeellin vitro．Methods Byusingtherecombinantlentiviralvector，thehumanIDO cDNA wastransfectedinto mouseDCcell(IDO—De)andco—culturewithT lymphocytesfrom theperipheralbloodofC57mouse．TheparentalDCcellsandDC cellstransfectedwithblankplasmidpEGFP(EGFP—DC)wasusedascontrolgroups．Afterculture，theTregcellsweresortedusing fluorescence-activatedcellsorting (FACS)．Results TheIDO genewastransfectedintoDC cellsuccessfullyandtheIDO-DC cells couldinducetheproliferationofTregcel1．TherewassignificantlydifferencebetweentheIDO—DC cellsandEG