黑素再生中药对体外培养的黑素细胞酪氨酸酶基因和c-kit基因表达的影响.pdfVIP

维普资讯 中国l临床医学 2008年 2月 第 15卷 第 1期 ClinicalMedicalJournalofChina，2008．Vo1．15，No．1 123 论著 黑素再生中药对体外培养的黑素细胞酪氨酸酶基因 和 c-kit基 因表达的影响 成爱华 韩梅海 摘要 目的：分析黑素再生中药对体外培养的黑素细胞酪氨酸酶(Tyr)和 c—kit基因表达的影响。方法：按照Halaban方法培 养黑素细胞，传代至3--5代细胞用于实验；用黑素再生中药分别配制不同浓度的TICVA培养基。分散酶消化传代后第 2天 加入所配培养基 ，仔细观察细胞形态和生长状况，5d后计数 ；采用 Bio-Rad蛋 白分析试剂盒方法检测蛋白含量 ；蛋白质印记参 照Halaban等方法。结果：高浓度黑素再生中药具有一定的细胞毒性 ，而8mg·mI。以下黑素再生液细胞毒性很 小；黑素再 生中药组细胞可溶性总蛋白质量浓度与对照组细胞可溶性总蛋 白浓度 ，无显著差异 (P0．05)，但细胞可溶性总蛋 白提高 了 6．7 ；在等量的总蛋 白中，黑素再生中药处理后的Tyr的含量增加了5．3 ，黑素再生中药组 c—kit表达增加了88．9 。结 论：黑素再生中药治疗 白癜风可能与Tyr基因的蛋 白表达有一定的关联，对 c—kit表达具有极显著的促进作用。 关键词 白癜风 ； 黑素再生 中药 ； 酪氨酸酶 ； c—kit基 因 中图分类号 R285．5 文献标 识码 A EffectsofM elanocytesRegeneration M edicineon CulturedM elanocytesTyrosinaseGeneandC-kitGeneEx— pression CHENGAihua HANMeihai BinzhouVitiligoHospitalofShandongProvince-Binzhou 25660() Abstract Objective：TostudytheeffectoftraditionalChinesemedicineontheexpressionofmelanocytetyrosinasegeneandC— kitinvitiligo．M ethods：ThiswasavitrostudyM elanocytesHalabanaccordancewiththetrainingmethods，andpassagedtO3tO 5cellsforexperimentswereused；M elanocytesrenewablepreparedChinesemedicinesweredifferentconcentrationsofTICVA medium．ScatteredenzymedigestionafterpassagebythetwodaysallocatedtOthemedium ，andcarefullyobservethegrowthof cellmorphology，5daysaftercounting．ProteincontentdetectedbyBio-Radproteinanalysiskit．Proteinimprintmethodssuch aslightHalaban．Results：Higherconcentrationsofblack—renewableChinesemedicinehascertain cytotoxicity，and8 mg · mI～ followingmelanocytesrenewableliquidcytotoxicsmaller．Thecellsofthecontrolgrouptotalsolubleproteinconcentra— tionandmelanocytecellregenerationmedicineconcentrationoftotalsolubleprotein，no statisticallysignificantdifferencewas found (P ()．05)，butthe