犬干扰素的基因工程研究进展.pdfVIP

山东畜牧兽医 2009年第30卷 犬干扰素的基因工程研究进展 王 艳 (山东省枣庄市畜牧兽医局 277800) 中图分类号：$829．7 文献标识码：A 文章编号：1007-1733(2009)03-0050-02 干扰素 (IFN)是多功能细胞因子家族 中的 有 定 的抗病毒性疾病的作用。 员，m十扰素诱牛剂作用于活细胞后， 细胞产生 2 干扰素的基因工程研究进展 的一种蛋白质 ，当它作用于其他细胞时，使其他细 为了将干扰素用于临床实践，科学家们经过了 胞立即获得抗病毒和抗肿瘤等多方面的免疫力。 几十年的不问断的努力，进行了干扰素的诱导物、 在发现干扰素具有广谱抗病毒、抗增殖、抗细 作用介质、血制品和基因工程 的研究。基因工程是 菌、抗寄生虫的生物活性及其强大的免疫调节作用 生物学中的一次大的革命，由于天然干扰素在实际 等诸多生物活性功能后，人们开始尝试用人工方法 应用中的限制，20世纪 70年代起科学家们开始探 在动物机体外或体内，用干扰素诱牛剂来诱导产生 索干扰素的基因工程生产，用基因工程的方法来改 十扰素。rf1于干扰素诱牛剂使用时的一些弊端，使 造：f扰素及其表达系统，干扰素的研究开始了一个 用这种方法产生的干扰素存在着局限性。20世纪 新纪元。 初，当分子生物学技术兴起以后，用基 因工程的方 2．1 对干扰素基因序列的研究 基因本身的序列 法来在体外大规模生产生物制品成为可能。自从 对基因的表达有着重要的影响。在利用大肠杆菌表 lssacs等于 1957年利用鸡胚绒毛尿囊研究流感病 达干扰素时，人们发现 由于宿主细胞 内Met特异性 毒干扰现象时发现干扰素以来，已经证 明在人、小 氨肽酶作用不完全而会引起N端不均一，而且不均 鼠、狗、羊、兔、豚鼠等哺乳动物 以及鱼类 、龟类 一 的程度因宿丰菌、表达载体、表达条件而有差异。 和昆虫等都有干扰素类似物质的产生。上1廿纪 7O 早在20世纪80年代就有人化学合成了含有大肠杆 年代 ，国外开始研究人的干扰素基L大j结构，其不同 菌偏爱密码予的IFN．ot2b基因，他们先合成了68个 类型十扰素的基因分别被克隆、表达出来，并经实 小核昔酸片段，再将这些片断连成3个大片段，最 验室中初步测定，用基 因工程方法产生的干扰素也 后 由这3个大片段连成完整的干扰素基因，并在大 具有抗病毒、抗增殖等生物学功能。上世=纪80年 肠杆菌中获得 了较高的表达 。 代末，旧外的学者们丌始了犬干扰素的研究工作 。 2．2 对干扰素表达系统的研究 在 20世纪 90年 我国科研工作者于 卜世纪末，也相继开始犬下扰素 代就有很多人开始改造干扰素的表达载体，以使其 的研究工作。 更有效的表达干扰素。有人构建了双顺反子翻译增 1 干扰素的临床应用价值 强子新型表达载体 pEC34，该载体利用终止 起始 由于干扰素有广谱 的抗病毒，增强免疫功能和 双顺反子表达结构，并在其中插入了原核翻译增强 对细胞牛长有抑制作用等生物学功能，故它有很大 予序列，在对表达载体检测时得到了 IFN—y的极高 的临床应用价值，但各类十扰素的临床应用也各有 表达。 侧重 ： 干扰素在大肠杆菌中多以包涵体形式表达，需 (1)IFN．o【为国际最流行 的产 品之一 ，是治疗 要经过变性复性的过程来获得具有活性的蛋白质。 病毒性疾病的良药，如治疗复发性疮疹、水痘、病 酵母为真核细胞，具有翻译后修饰的功能，这样用 毒性角膜炎、疣病等；对巨噬细胞病毒、冠状病毒 酵母表达的蛋 白更接近天然蛋白的构象，因此有人 (如 SARS)也有一定疗效；另外也是一种很好的 开始研究利用酵母来表达干扰素。也有利用毕赤酵 肿瘤辅助治疗药物，如慢性白血病、淋巴瘤、多发 母来表达复合干扰素突变体 ，并且获得了成功。还 性骨髓瘤等。 有利用毕赤酵母表达了猪1FN-v，并利用表达 的干 (2