CBF3基因的克隆、生物信息学分析及植物表达载体的构建.pdfVIP

湖南农业科学 2009，(2)：1-3，6 HunanA culturalSciences CBF3基因的克隆、生物信息学分析及植物表达 载体的构建 刘 俊 -，，蔡平钟 ，马 林 ，张志雄 ，向跃武 ， 张志勇 ，蒲志刚2，王闵霞 f1．西南科技大学生命科学与工程学院，四川 绵阳621000； 2．四川省农业科学院生物技术核技术研究所，四川 成都610066) 摘 要：bk拟南芥基因组DNA中分别克隆了CBF3基因和逆境诱导型启动子Rd29A，测序结果显示：克隆的CBF3基因长776 bp，编码216个氨基酸，与GeneBank公布的的序列相比对，核苷酸同源性达到99．2％，并利用生物信息学手段对其氨基酸序 列、进化树、理化性质、疏水性，亲水性等进行分析；启动子Rd29A全长为956bp，与已报道的该启动子序列比较，其核苷酸同源 性为99．5％。以双元载体pCAMBIA1301为基础，成功构建了植物表达载体pCAMBIA1301一Rd29A—CBF3，为利用CBF2基因提 高植物的耐寒性创造了条件。 关键词：CBF3；启动子；克隆；生物信息学；植物表达载体 中图分类号 ：Q943．2 文献标识码：A 文章编号：10o6—060X(2009)02—0001—03 Cloning，BioinformaticsAnalysisofCBF3andConstructionof PlantExpressionVector LIUJun’．-，CAIPing-Zhong坦，MA Lin’，ZHANG Zhi-Xiong，XlANG Yue-wu， PUZhi-gang，ZHANG Zhi-yong，WangMin-xia2 仃．CollegeofLifeScienceandEngineering,SouthwestUniversityofSceinceandTechnology,Mianyang621000,PRC； 2．1nstituteofBiotechnoolygandNucelarTechnoloyg,SichuanAcademyofagicuhuralSceinces，Chengdu610066,PRcJ Abstract：C-repeatbindingfactor3andhypothermalinducerpromoterRd29Awere amplifiedfrom thegenomic DNA ofArabidopsisthalianaColumbia．Sequencingresultsshowed thattheclonedCBF3genehas776bpsanden— codes216aminoacids．andhas99．2％ identitywithhtesequencepublishedonGeneBank．Themethodsofbioinfor- matiesare印pliedtoanalyzethesimilarityofaminoacidsequences，phylogenetictree，physico—chemicalpropertyand hydrophobicityandhydrophilia；thepromoterRd29A has956bps．andhas99．5％ identitywiththealreadypublished promotersequence．Basedon thebinaryvectorpCAMBIA1301．hteplantexpressionvectorpCAMBIA1301一Rd29A— CBF3Was constructedsuccessfully，whichcouldmateriallyimprovethecold-toleranceabilityofplants． Keywords：CBF3；promotor,clone；bioinformatics；p