白细胞介素-1β和瘦素对人子宫内膜细胞粘附分子-1和金属蛋白酶9的影响.docVIP

白细胞介素-1β和瘦素对人子宫内膜细胞粘附分子-1和金属蛋白酶9的影响 作者：郝翠芳，郎翠红，沈肖方,王昕荣 【摘要】 目的 探讨白介素-1β(IL-1β)和瘦素(leptin)在体外培养的子宫内膜中对与着床密切相关的因子细胞间粘附分子-1(ICAM-1)和金属蛋白酶9(MMP9)的影响。方法 建立子宫内膜体外培养模型，分别用不同浓度的IL-1β和leptin进行干预，并采用半定量RT-PCR方法检测ICAM-1和MMP9 mRNA的表达变化。结果 分别经不同浓度的IL-1β和leptin干预后(0.1ng/ml的IL-1β除外)，ICAM-1、MMP9 mRNA较对照组相比表达增加，且随浓度的升高，表达量呈上升趋势。结论 不同浓度的IL-1β和leptin可以通过促进子宫内膜中ICAM-1、MMP9 mRNA的表达，进而为胚胎着床做好了充分的准备。 【关键词】 白细胞介素-1;细胞间粘附分子-1;金属蛋白酶9 　[Abstract] Objective In order to study the mechanism of the system of interleukin-1β and leptin on embryo implantation in the early stage, we have observed the expression of intercellular adhesion molecule-1 (ICAM-1) and metalloproteinase 9 (MMP9) intervened separately by different density of interleukin-1β (IL-1β)or leptin which were closely related to the implantation in the cultured human endometrial cells of the mid-secretory phase.Methods The expressions of ICAM-1 and MMP9 in the medium of model which have been intervened by IL-1β or leptin were detected by semiquantitative real time polymerase chain reaction.Results The expressions of both ICAM-1 and MMP9 mRNA were increased with the increasing density compared with the control group.Conclusion Different amounts of IL-1β and leptin can upregulate the expression of ICAM-1 and MMP9,thus they maybe make full preparation for embryo implantation. 　　[Key words] interleukin-1β;intercellular adhesion molecule-1;matrix metalloproteinase 9 　　具有着床功能的胚胎和接受能力的子宫内膜在功能和形态上的同步性是胚胎着床的关键，而正常的子宫内膜主要在排卵后6～10天允许胚胎着床称为“种植窗期”，这需要许多细胞因子如IL-1β和leptin的参与，本文通过不同浓度的IL-1β和leptin干预体外培养的分泌中期的子宫内膜，检测与胚胎粘附和侵入密切相关的ICAM-1和MMP9的表达变化，来探讨IL-1β和leptin对胚胎着床的影响。 　　1 材料与方法 　　1.1 标本来源 　　子宫内膜标本取自因男方因素不孕在烟台毓璜顶医院生殖中心于分泌中期行诊断性刮宫的育龄期妇女，年龄27～33岁，月经周期26～30天。刮取的子宫内膜立即放入盛有DMEM-F12培养基(DMEM培养基与F12培养基1：1混合，含10%胎牛血清，100U/ml青霉素，0.2mg/ml链霉素，以下简称D-F培养基)的试管中，10min内进行分离培养。 　　1.2 主要试剂 　　细胞培养基(DMEM/F12)(Hyclone)、囊胚培养液(Hyclone)、胎牛血清(杭州四季青生物制品公司)、胶原酶(sigma公司)、胰酶(烟台赛尔斯公司)、双抗(烟台赛尔斯公司)、IL-1β(Santa Cruz)、leptin(Peprotech)、TRIZOL(