全氟辛烷磺酸(PFOS) 暴露对小鼠Th1 与Th2 免疫应答失衡的影响研究.docVIP

全氟辛烷磺酸（PFOS）暴露对小鼠Th1与Th2免疫应答失衡的影响研究 董光辉1*， 1，2 (1中国医科大学公共卫生学院，沈阳，110001；2大连理工大学环境与生命学院工业生态与环境工程教育部重点实验室，大连，116024；*联系人，E-mail：ghdong@mail.cmu.edu.cn (1 School of Public Health, China Medical University, Shenyang 110001, PR China; 2 School of Environmental and Biological Science and Technology, Dalian University of Technology, Key Laboratory of Industrial Ecology and Environmental Engineering, MOE, Dalian 116024, PR China.) 引言 一种新型持久性有机化合物全氟辛烷磺酸pefluorooetanesulfonate，PFOS已经在生态系统中广泛传播，并且正在通过食物链的生物浓缩和生物放大效应进行生物种群间的转移，最终以较高浓度蓄积在食物链高位生物（包括食肉动物和人）体内。前期研究结果显示，PFOS可降低小鼠免疫器官的重量，减少免疫器官中CD4+、CD8+T淋巴细胞的含量，表明PFOS可产生免疫抑制效应。细胞因子分泌水平是反映免疫细胞活化程度的重要指标之一。在免疫应答过程中，细胞因子可以直接或间接地影响到抗原提呈、淋巴细胞的分化成熟以及抗体产生等多种过程，发挥重要的免疫调节作用。本研究采用每天1次经口灌胃染毒的方法，研究了PFOS经口重复剂量染毒对C57BL/6小鼠脾淋巴细胞培养上清中细胞因子IL-2、IL-4、IL-10和IFN-(分泌水平的影响，以期评价PFOS暴露后宿主免疫状态的变化。 材料与方法.1 实验动物及染毒 选择SPF级C57BL/6雄性小鼠48只，体重为18～20 g，购自由中国医学科学院实验动物研究所提供(许可证编号:SCXK京2004-0001)。将实验动物按体重随机分为4组，分别为对照组（2% Tween-80）和5、20、40 mg/kg PFOS染毒组，每组12只。采用灌胃方式进行染毒，每天染毒1次，连续染毒7 d。 .2细胞因子IL-4和IFN-(IL-2+和IL-10淋巴细胞数量常规制备脾细胞悬液按照双抗体夹心DuoSet ELISAELISpot试剂盒说明书进行操作，酶标仪于450 nm处检测光密度（OD）值。检测小鼠脾细胞培养上清中IL-4和IFN-(的水平结果应用 softMaxPro43.ILS软件分析，计算细胞因子含量（pg/ml）。采用ELISpot自动分析仪读板，计数IL-2或IL-10细胞数量。 3．结果与讨论3.1 PFOS染毒对雄性C57BL/6小鼠血清PFOS浓度和器官指数的影响 经口染毒7天后，20、40mg PFOS/kg/d剂量组小鼠的脾脏指数和胸腺指数均显著的低于对照组。而5、20、40mg PFOS/kg/d剂量组小鼠的肝脏指数分别增高了34%、79%和117%。肾脏指数未见显著的改变。虽然对照组血清中PFOS浓度低于检测限（0.05mg/L），但试验组小鼠血清中PFOS浓度随着染毒剂量的增高而呈增高趋势（表1）。 表1 雄性C57BL/6小鼠暴露PFOS不同剂量下体重和器官指数水平 PFOS mg/kg Serum PFOS$ 体重 变化? 脾脏 指数? 胸腺 指数? 肾脏 指数? 肝脏 指数? 0 BDL 1.04±0.18 0.44±0.03 0.30±0.02 1.28±0.02 5.56±0.08 5 110.46±6.18 0.72±0.21 0.41±0.02 0.26±0.01 1.24±0.05 7.45±0.13* 20 280.65±16.33# -1.92±0.34* 0.36±0.04* 0.21±0.02* 1.35±0.05 9.95±0.25* 40 338.01±23.92# -4.50±0.37* 0.24±0.02* 0.12±0.01* 1.29±0.08 12.09±0.37* 注：$mg/L. BDL,低于检测限(0.05mg/L). #与5mg/kg/day PFOS剂量组比较 (p ≤.05). *与对照组比较 (p≤05). ?染毒前体重-染毒7天后体重. ?器官指数=[器官湿重/体重] ×100. 3.2 PFOS染毒7天对C57BL/6小鼠细胞因子水平的影响 通过ELISA法检测脾细胞培养上清中IFN-(和IL-4的分泌水平，结果如图1。与对照组相比，随着PFOS