固相萃取-离子色谱法测定生物样品中氟乙酸钠含量研究.pdf

固相萃取一离子色谱法测定生物样品中 氟乙酸钠含量的研究 作 者：杨萍 指导老师：邓芹英教授 专 业：有机化学 摘要 近年来，鼠药中毒已经成为一个严重的社会问题和环境问题，氟乙酰胺是鼠 药中毒的主要部分之一。氟乙酰胺剧毒，进入生物体内容易转化为氟乙酸盐及其 它物质。受害生物体内氟乙酰胺(氟乙酸钠)含量极微，加上生物检材成分复杂， 要经过复杂的前处理过程才‘能将其有效的提取，分离和富集，而且氟乙酰胺(氟 乙酸钠)分子小、极性大、难挥发、没有明显的紫外吸收，用常规的气相色谱(GC) 和液相色谱(HPLC)不能直接检测，必需通过衍生化，在分子中引进能被高灵 敏检测的基团。以适应于NPD和ECD等的GC检测，或紫外和荧光的HPLC检 测：衍生化反应又可能带来新的杂质，使色谱图复杂化，干扰增大，氟乙酰胺类 毒药是目前检验难度最大的毒物之一。目前对氟乙酰胺(氟乙酸钠)尚没有～。种 统一准确的检测方法，因此建立一种简单、易行、灵敏、快速的定性定量测定方 法，解决日益增多的氟乙酰胺类鼠药中毒案件的侦破，查明中毒原因，寻找毒源， 有效的打击犯罪，保障广大人民群众的生命财产具有非常重要的意义。 本论文研究了用水提取，固相萃取法纯化、富集生物样品中氟乙酸钠的样品 前处理方法，用离子色谱作为监控固相萃取回收率的手段。采用C18固相萃取柱 和SAX阴离子交换柱两种不同的原理的固相萃取法，C18固相萃取柱不保留氟乙 酸钠，用来除去检材中大部分有机干扰成分，C，8固相萃取柱萃取氟乙酸钠同收 率达99～108％，血样中的回收率在85％以上；SAX阴离子交换柱则保留氟乙酸 根离r，用小体积的洗脱液沈脱而使样品富集，能够同时净化和富集氟乙酸钠。 通过对固相萃取条件的优化，取得良好的萃取效果，用1．5mL的O．5mol／L的盐 酸做洗脱液tfui收率为9i％以上，富集倍数可达25倍，最低能够检测0．001mg／L 的氟乙酸钠溶液，血样中最低能够检测到O．5mg／L，全程回收率在80％以上 本论文建立了用离子色谱测定生物样品中氟乙酸钠含量的方法。在O．2mL 血液样品中加入lmL纯水，然后用乙腈沉淀蛋白质，待蛋白质沉降后取上层清 液经O．45,um过滤头过滤，滤液注进离子色谱仪进行氟乙酸钠的定性和定量分析。 Ion 用Dionex600离子色谱仪，配合电导检测器，DionexPacASl 1明离子交换 25,uL定量进样环，测定生物样品中的氟乙酸钠，在0．10～10．OⅣg／mL浓度范围 内峰面积和质量浓度呈良好的线性范围(r2=0．9978)，方法的检测限为0．05ug／mL。 实际测定了血液样品的氟乙酸钠，平均全程回收率在85％以L。该法也可用于食 物和生物检材中氟乙酸钠的测定。 本研究还对毛细管电泳测定氟乙酸钠的方法进行了初步研究。 关键词： 氟乙酸钠； 固相萃取：离子色谱；毛细管电泳 on of StudyDeterminationSodiumFluoroacetatein BiologicalSamplebySolidPhase Chromatography Name：YangPing Supervisor：Professor Deng Qinying Chemistry Major：Organic Abstraet The ofraticidehasbecomeaserioussocial a