甲磺酸伊马替尼对K562细胞SHIP2基因表达的影响及意义.pdf

中文摘要 甲磺酸伊马替尼对K562细胞S…P-2基因表达 的影响及意义 摘 要 leukemia， 目的：慢性粒细胞白血病(chronicmyelocytic CML)作为临床常见的一种骨髓增殖性疾病，其病变克隆中 P210具有很强的酪氨酸激酶活性，该蛋白的出现是CML发病 通删11。磷脂酰肌醇激酶(P13K)接受生长信号而被激活，继 而维持细胞的生存而对抗由各种因素引起的细胞凋亡【21。目 前很多研究都集中在磷酸肌醇介导的信号通路与凋亡的相 和半胱氨酸蛋白酶．1、半胱氨酸蛋白酶．3磷酸化使之失活， 对P13刚Akt路径具有重要的负调控作用。肌醇5’一磷酸酶(SH2 domain inositol containing 家族，主要表达于造血细胞，在造血细胞发生发展及其功能 方面起着关键的负调控作用。研究表明，SHIP抑制造血胞Akt 的磷酸化【5】。该基因的主要功能是特异地降解磷脂酰肌醇三 细胞内的第二信使，在细胞的生存过程中发挥着重要功能。 SHIP基因敲除小鼠表现为慢性进行性粒细胞和巨噬细胞的 中文摘要 增生，伴有Akt的磷酸化水平增加以及时间的延长，并由于 骨髓细胞对重要脏器的浸润而导致骨髓增殖性疾病，生存期 缩短。此外，慢性粒细胞白血病中bcr／abl融合基因的阳性表。 达导致SHIP基因表达水平降低，表现出粒细胞极度增多，且 对化疗药物耐药。上述研究强烈提示，在造血细胞，SHIP基 因可能作为抑癌基因而发挥作用。另外研究显示，CML患者 的SHIP基因表达水平明显减低甚至缺如，原因是由于bcr／abl 后，SHIP基因表达恢复，提示磷脂酰肌醇传导通路在CML 的发病中起了关键作用【6】。新近发现的SHIP．2基因与SHIP．1 高度同源，均属于5’．磷酸酶家族，但是相比较SHIP一1，它的表 达更为广泛，不但表达于造血细胞，还表达于组织细胞。值 可能也存在一定的作用。本实验旨在观察经甲磺酸伊马替尼 的表达情况及Akt的磷酸化水平，探讨SHIP．2基因在慢性粒 细胞白血病的发生发展过程中可能的作用及意义。 方法：以不同浓度甲磺酸伊玛替尼对K562细胞进行处 理，在不同时段收集细胞，用实时定量方法检测干预组与空 通过细胞培养方法对慢性粒细胞白血病急变细胞株K562进 行传代培养，取对数期细胞，MTT法测定SHIP．2基因表达 水平改变对K562细胞增殖的影响。通过Westemblot方法检 测不同干预时间下K562细胞AKt磷酸化水平。 结果：l 中文摘要 水平随着药物浓度增加而逐渐降低(氏O．01)；同一药物浓 度干预的K562细胞，随着时间延长，bcr／abl融合基因表达降 低(尸O．01)。 mRNA 2随着bcr／abl表达水平的下降，K562细胞中SHIP．2 表达水平呈上升趋势(PO．01)。 3 随着SHIP．2表达增加，Akt磷酸化水平呈下降趋势；同时 K562细胞增殖明显受抑。 结论：甲磺酸伊马替尼封闭K562细胞bcr／abl表达后， SHIP2基因表达显著上调，同时伴有Akt磷酸化水平下降， K562细胞增殖减弱，SHIP一2基因可能在白血病发生发展过 程中发挥负调控作用。 Akt磷酸化 英文摘要 Effecton of inK562 SHIP一2 Gleevec cells gene andit’S significance ABSTRACT ective：CMLasacommonclinic