胃癌病人外周血CK20mRNA表达与透明质酸浓度变化的研究.pdf

胃癌病人外周血CK20mRNA表达 与透明质酸浓度变化的研究 内科消化专业 研究生：王庆才 导师：赵幼安 前 言 胃癌是世界上十大恶性肿瘤之一，在我国的死亡率居 各种癌症之首，全国年死亡率男性为20．93／10万，女性为 10．16／10万；中国在世界范围内属于胃癌高发地区。外科手术 仍然是目前治疗胃癌的主要方法，也是有可能治愈胃癌的唯一 途径，但是手术作为一种局部治疗的手段也有其不足之处。导 致手术失败的原因主要有三：一是手术时病变多已属中晚期， 已有远处转移或局部病变有广泛浸润累及重要脏器，以致无法 施行病变彻底清除术。其次，手术不能切除时可能已存在亚临 床转移灶。另外，手术操作本身也有可能促使肿瘤细胞扩散转 移。只有明确地判断肿瘤转移与否、转移途径及范围，才能制 订出更为合理的手术方案，也才能予以及时的辅助治疗。然而 常规病理实验诊断技术以及目前的影像学技术，还不能确定和 发现肿瘤细胞的微小转移灶及血循环中的游离瘤细胞。假若血 1 循环中的胃癌细胞能在治疗前就被检出，对胃癌的治疗将起很 大的帮助作用。对于胃癌切除术后血液中存在的胃癌细胞进行 检测，可提高胃癌术后复发或转移的检出。 由于血循环中的肿瘤细胞数量极少，检测十分困难。对 肿瘤病人外周血癌细胞的检测有许多方法，但大多数敏感性和 特异性较差，不能得到可靠的结果(1--3)。近年来，逆转录．聚 Chain 合酶链反应(Reverse Reaction， TranscriptionPolymerase RT-PCR)技术的广泛应用，使得肿瘤的转移检测更准确、更 灵敏、更方便。RT-PCR技术检测肿瘤细胞特异性基因较检测 肿瘤蛋白质抗原更具有敏感性，其敏感性可达到每5ML全血 中仅有1个癌细胞即可被辨认，这是一般免疫细胞学方法或免 疫组化法所无法达到的检测水平。 许多上皮来源的癌细胞如胃癌、大肠癌、乳腺癌等，均 上皮细胞的特征之一，它们是分布于上皮细胞的中间纤维丝， 包括至少20个成员‘钔。其中细胞角蛋白20(CK20)有严格 的上皮特异性分布，非上皮来源的组织或细胞如正常血液骨髓 及淋巴结不表达CK20，因而可做为检测血液、淋巴结中上皮 性肿瘤转移的标志。 2 Acid，HA)是糖胺多糖 透明质酸(Hyaluronic 在机体的许多发育和调控过程，如细胞黏附、器官形成、创伤 愈合、肿瘤发生和血管形成中，起着重要作用，大量HA抑制 肿瘤宿主的细胞和体液免疫功能，目前认为HA是恶性肿瘤的 标记物之一(∞。 本研究应用RT-PCR方法测定胃癌外周血CK20、采用 放射免疫分析法测定透明质酸，旨在进一步阐明CK20与透明 质酸在胃癌诊断分期、判定早期微转移及复发中的临床意义， 同时了解CK20表达和透明质酸不同浓度之间的关系，以及与 胃癌分期关系及对预后的影响，从而进一步指导临床综合治 疗。 ． 临床材料 1．病例选择：收集1999年11月至2000年11月经胃镜活 检及手术病理证实为胃癌55例。同期胃炎及胃溃疡46例。55 例胃癌中，男性45例，女性10例。年龄最小36岁，最大79 岁，平均57．5岁。入选的55例胃癌均无慢性肝病及肾功不全 史。45例B超CT等影像学检查未见有明显的转移灶。 2．分组：①正常对照组：选择正常献血员50例为测定CK20 { 与HA的正常对照；②实体标本组：应用胃癌组织及良性胃病 胃粘膜组织，通过检测其CK20mRNA表达，建立实验方法；⑨ 胃癌组：分早