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从西蜂DNA分子中寻找与高产王桨相关的特异基因标记及其鉴定 从西蜂DNA分子中寻找与高产王浆 相关的特异基因标记及其鉴定 研究生 张雅娟 导 师 蒋 没 王尉平 苏州大学生命科学院生物技术系 生物化学教研室 中文摘要 本研究以11组随机引物 (PPz,P3,P4,Ps,Ph,PPs,P-K, W)对不同产浆量的四品系西蜂 (低产浆:喀尼阿兰蜂:高产浆:浙农 大、平及“肖山等意蜂，的基因组DNA进行RAPD-PCR遗传分析西·‘ (5’-CGGCCCCGGT-3)为随机引物通过RAPD-PCR扩增技术从西蜂的 不同三品系 (浙农大、平湖和肖山等意蜂)的DNA分子中获得了与高 产浆相关的共同特异基因标记-W316bp片段，用非放射性标记物一地 高辛(DIG)，使用随机引物标记法，制备成DIG-W316bp探针一，再与高、 低产浆西蜂的基因组 DNA及 PCR扩增产物分别进行斑点杂交及 Southern杂交鉴定。结果:(1)以W为引物，在高产王浆的浙农人、 平湖、肖山等三品系意蜂的基因组DNA的扩增产物中找到了与高产浆 优良性状相关的特异基因标记— W316bp片段。(2)然后将W316标记 成DIG-W316bp探针，再与高、低产王浆西蜂的DNA基因组及扩增产物 分别进行斑点杂交、Southern杂交以此鉴别高、低产王浆西蜂。(3) 发现W316bp探针只与高产T:浆西蜂的PCR扩增产物及其基因组DNA杂 交，而不与低产浆西蜂的PCR扩增产物及其基因组DNA杂交。以弃结 从西蜂DNA分子中寻找与高产王桨相关的特异基因标记及其鉴定 果提示:W3166p对产浆高的西蜂 (浙农大、平湖和肖山等意蜂)是特 异的，W316bp与产浆高西蜂基因组是同源的，由此可以推断W316bp 可能是高产浆西蜂优良性状相关的特异基因标记。应用W316bp探针对 产浆量不同的西蜂可以在实验室进行快速 (48h?鉴别，确定高产浆蜂 群 为蜂农在分子水平上选择高产浆的西蜂提供了科学依据，同时为 进 步寻找高产浆西蜂的相关基因打下了良好基础。 关键词 西澎基因组DNA“随机引物一PCR探针 杂交 从西蜂DNA分子中寻找与高产王桨相关的特异基因标记及其鉴定 摘要 STUDYONASPECIALGENEMARKERINA.M.LINDAUER OFHIGHROYALJELLYQUANTITYANDITSAPPRAISAL ABSTRACT Inthisreport,11randomprimers(P,,Pz,P3,P4,P5,P6,P7,P8,P9, K,W)andRAPD(RandomAmplifiedPolymorphicDNA)--PCRwere usedtoamplifyandhereditarilyanalyzethegenomicDNAinfourrace ofApismelliferaLindauer(A.m.Lindaueroflow royaljelly quantity-carnica;A.m.Lindauerofhighroyaljelly quantity: Zhenongda，PinghuandXiaoshanofA.m.ligustica)whichwere differentinroyaljellyquantity.W316bp(bp,basepair)isacommon specialDNA fragmentused PCR with random primerW (5-CGGCCCCGGT-3)in3raceofApismelliferaLindauer (Zhenongda,PinghuandXiaoshanofhighroyaljellyquantity). W3166pwasmarkedwithdigoxigenin(DIG).ProbeDIG-W316bp hybridizedwithPCRproductsandgenomicDNAofA.m.Lindauerof highandlowroyaljellyquantity