胆固醇合成抑制剂Lovastatin对白血病细胞增殖、凋亡作用的实验及临床研究.pdfVIP

胆固醉合成抑制荆Lovastatin对白血病细胸增殖、凋亡作鱼丝丝型继 中文摘要 了 - . 今 胆固醇合成抑制剂Lovastatin对白血病细胞 人时7增殖、凋亡作用的实瓤临maff究 苏州大学附属第一医院血液科 研究生:国风 .球 导师:陈子兴 教授 I+片扮;称嘛 ‘中文摘要 一、 Lovastatin对白血病细胞株和原代培养细胞增殖及活力影响 · 目的:研究胆固醇和异戊二烯生物合成抑制剂Lovastatin(L函了对人 NB4,HL-60,KG-1,K562白血病细胞株以及白血病原代培养细胞的增 殖及活力的影响扰方法利用m-l1，比色法，台盼蓝拒染法观察LOV对 NB4,HL-60,KG-1,K562以及20例白血病原代培养细胞增殖及细胞 活力的作用。结果①LOV可以抑制NB4,HL-60,KG-1,K562细胞增 殖，IC50分别为12.59,17.16,51.65,58.95jimol/L;②LOV不同程度 抑制白血病原代培养细胞增殖，敏感性与年龄、白血病分型、外周血白 细胞数、骨髓原始细胞比例等无矍狮比;QsLOV抑制四株白血病细 胞活力，呈现剂s-时间依赖叫fib-LOV能删NB4,HL-60,KG-1, 细胞增殖并影响细胞活力，对白血病原代培养细胞呈现不同程度的 关键词Lovastatin，白奥壑胞株，原代细胞，细胞增殖;细胞活力 二、Lovastatin诱导白血病细胞株凋亡和分化的研究夕 目的:观察LOV诱导NB4,HL-60,KG-1,K562白血病细胞凋亡及分 化的作用。方法:通过细胞形态学观察，DNA凝胶电泳，流式细胞术细 胞周期分析 TUNEL,RT-PCR半定量测定bcl-2mRNA水平，NBT还 原率等实验，体外系统观察LOV诱导NB4,.HL-60,KG-1,K562细胞 凋亡和分化情况。峥果伽 ，H‘L-60,KG-1，K562细胞分别经’。， l 逃迥 丝c鱼JLovastatin36迫些迎型堕,追鲤AilM型壁— — 、丝鱼1 20,60,60pmol/LLOV作用48小时后，出现典型的凋亡形态学改变; 并可见典型的DNA梯带;流式细胞仪测得典型的亚二倍体凋亡峰，大 部分细胞阻滞于GI/S期;LOV在诱导NB4,HL-60细胞凋亡过程中随 作用时间延长，bcl-2表达水平逐渐下降。②单用LOV对NB4细胞无诱 导分化作用，V*ATRA弊缈组4天的NBT还原率与朝ATRA组 相比，差别无统计学意义/0结ilk}LOV诱导NB4,HL-60,KG-1,K562 细胞凋亡，阻滞细胞周期进程于GI/S期;bcl-2参与了LOV诱导凋亡 的基因调控。LOV不影响NB4细胞分化。 细胞株;细胞凋亡;细胞分化 ialLovastt; 三、Lovastatin对NB4 细胞Ras基因、p21w蛋白膜结合作用影响的体外 试验 目的:以NB4细胞为模型，探讨LOV对白血病细胞的作用机制。方法:利 用逆转录聚合酶链反应半定量测定LOV作用于NB4细胞不同时间H- Ras,K-Ras,N-Ras癌基因mRNA表达水平:同时采用流式细胞术测定 NB4细胞p21s总蛋白、膜蛋白的表达。姑果①NB4细胞H,K,N-Ras 基因表达均为阳性。②LOV处理不同时间的NB4细胞H,K,N-Ras基 因转录水平无明显变化。逗p21 白水平无变化，而细胞膜表面p21pas 蛋白水平随时间呈进行性下 :L