大鼠脑创伤后一氧化氮合酶的表达及氨基胍的神经保护作用.pdfVIP

大鼠脑创伤后NOS的表达和氨基脆的神经保护作用 中文摘要 中文摘要 题 目:大鼠脑创伤后NOS的表达 和氮基服的神经保护作用 研究生:车志豪 导 师:惠国植 目的:一氧化氮((nitricoxide,NO)是一种自由基性质的气体，且具有一个 额外的电子，化学性质活泼不稳定，半衰期极短(1-5秒)。它参与血管 舒缩状态的调节，免疫功能的调制以及神经信息传递，是一种重要的信 息物质。9(1典的递质，如乙酞胆碱，去甲肾上腺素，多巴胺在脑外伤后 的表达均有大量的研究，但对于脑外伤后脑组织中NO的表达规律和它 在脑伤中所起的作用，国内尚无报道，故设计了这一实验。因为NO半 synthase,NOS)的活性 衰期极短，所卿门用一氧化氮合酶n(itricoxide 分析来进行NO表达的时相分析。并用诱导性一氧化氮合酶(Inducible nitricoxidesynthase,iNOS)的阻滞剂氨基孤来探讨组滞NO的生成能否 减轻脑损伤。 材料和方法:实验分三步:第一步用64只雄性SD大鼠。大鼠用2%戊巴 妥钠腹腔注射麻醉并用自由落体打击架打击右顶叶皮质，造成中度脑 挫裂伤，并分别在伤后5分钟，6小时，12小时，24小时，48小时，4 天，7天，10天和对照组一起处死。脑组织匀浆进行分光光度法分析，测 定NOS的活性。第二步用80只雄性SD大鼠，60只SD大鼠进行免疫 组化分析，免疫染色在脑伤后6小时，12小时，24小时，48小时，4天， 7天，10天。切片用免疫组化的方法。20只大鼠做组织病理学分析，分 氨基肌处理组和对照组。并进行了神经功能测定。第三步神经功能测定 采用24只SD大鼠，分为三个小组:对照组 (假手术组)，创伤组，氨基 肛处理组，在创伤后1-7天分别进行神经功能测定。 结果:NOS的活性在伤后5分钟就有升高，而到6小时较对照组明显增 高，并达到峰值35.01士0.07U/mg脑组织，而到伤后24小时基本恢复正 常水平24.9土0.07U/mg脑组织，直到伤后4-7天NOS的活性又有升高达 大鼠脑创伤后NOS的表达和氮基脱的神经保护作用 中文摘要 到1.58士0.09U/mg组织。免疫组化结果显示，伤后24小时阳性细胞就能 够见到，但较散在，伤后7天时阳性细胞比较密集，伤后10天时就明显 减少，神经细胞和胶质细胞均有表达，且在神经细胞中的表达并不少见， 胞浆与胞核均呈阳性。病理学结果提示，两组动物的右顶叶均有一境界 清楚的挫伤区域，氨基肌处理组动物皮质神经元坏死减少，并且保护良 好，神经胶质细胞变性程度减轻，细胞及血管周围间隙减小，白质水肿 减轻。氨基肌处理组动物与对照组相比较，平衡功能改善无明显变化， 而行走试验有明显改善，伤后7天连续，。定行走试验P(0.01少一一犷一 结论:NO作为神经递质在脑外伤后的脑组织中有增加，并呈时相表达的 规律，伤后6小时和伤后4-7天两次表达增加，在脑继发损伤中起重要作 用。免疫组化结果做了进一步的证实。当用iNOS阻滞剂氨基服时明显改 善了组织病理学的结果和损伤大鼠的神经功能。这样阻断iNOS的活性的 方法将是治疗脑创伤的又一有效的途径。 关键词: 自由落体 大鼠 脑挫裂伤 一氧化氮 一氧化氮合酶 氨基肛 大鼠脑创伤后NOS的表达和氮基服的神经保护作用 英文摘要 NitricOxideSynthaseExpressionafterTraumaticBrainInjury andNeuroprotectionwithAminoguanidineTreatmentsinRats Abstract O坷ective:Weinvestigatedthetimecourseofnitricoxidesynthase困OS) enzymaticactiviytandimmunocytochemicallocalizationofinducibl