人伴铝蛋白CCTβ亚基全长cDNA的克隆、表达及其染色体定位.pdfVIP

人序Vff,?CCTP.5E垂毛全{EcDNA必京廖.RIL*A典一袭白A}Z 薄R丫功丈夕 摘 要 (侣蛋白能促进其底蛋“白形成正确的叠“结“，但伴侣蛋白不构 成底物蛋白的组分。在真核细胞质中的伴侣蛋白称 CCT-Chaperonin ContainingTCP-1(tailesscomplexpolypeptide-1)，是第一个鉴别 出来的细胞质伴侣蛋白，它作用的底物主要为肌动蛋白和微管蛋白。因 此它参与形成真核细胞骨架蛋白功能结构，为细胞生长所必需。通常哺 乳动物的CC:是由:-9种不同亚基所组成的蛋白复合体头本研究从人的 U 翠丸组织cDNA文库中分离出一条新cDNA，全长 1935bp，其中含有一个 16056p的开放阅读框，它编码了535个氨基酸。将该序发送至美国NCBI (NationalCenterforBiotechnologyInformation)GenBank数据库， 获登录号为AF026166。基于从该cDNA推导的蛋白质与酿酒酵母、裂殖 酵母、线虫、小鼠等的CCT0亚基存在较高的同源性，尤其是与小鼠的 CCT0同源性高达970，由这个新基因所编码的推导蛋白可能就是人的CCT ”亚基。乓CCT”亚基同样包含两个各“物种的所有CCT亚基中高度保 守的基序:GDGTTSV(氨基酸96-102)和VY(P/A)GGG(氨基酸408-412), 这两个保守肤段与促使ATP水解有关。Northern杂交结果显示，人CCT 0基因的转录本长约 2.Okb，它在多种组织中均有表达，但在翠丸组织 中呈超量表达，约为其它组织表达量的 3-24倍。利用辐射杂交图谱 (RadiationHybridMapping,RHmapping)定位技术，将 CCT0基因 定位于人染色体 12g14区带。此外，通过同源检索，发现装在 人洋趋野白CCTflff 至妾,DNA432绪,涛送交真袭白Azf} 拥要丫功戈 BAC(bacterialartificialchromosome)中的人类基因组序列U91327就 是 CCT0基因组序列5’一末端。经这两个序列的对比分析，划定了CCT ”基因5’一末“的7个外显子。〕 J 关键词:CCT0亚基订cDNA基因登录号AF026166 人染色体12814 又洋lpfE3CCT6亚寡全妾cDNA劣京壁、4ti-kM真卖色V2( 簿萝r英一戈夕 ABSTRACT Chaperoninsassisttheproperfoldingofproteinswithout beingpartoftheproteins.Theeukaryoticcytosolicchaperonin, CCT-ChaperoninContainingTCP-1(tailesscomplexpolypeptide-1) wasthefirstidentifiedchaperoninfromthecytosolicproteinand itsmainsubstratesareactinsandtubulins.Soitisinvolvedin theconformationofcytoskeletalproteinsandisessentialforcell growth.MammalianCCTiscommonlyaproteincomplexcomposedof 7-9subunitspecies.Wehaveisolatedanovelfull一lengthcDNAfrom cDNAlibraryofhumantestis.ThiscDNAof1935bycontainsan1605 byopenreadingframe(ORF)encoding535aminoacids(aa).Wesent the sequence to NCBI (NationalCenter for Biotechnology Info