液相色谱-串联质谱法研究地克珠利在家兔组织中残留及消除规律.pdfVIP

家兔安全生产专题 液相色谱一串联质谱法研究地克珠利在家兔组织中残留及消除规律 杨丽萍，高淑霞，孙海涛，姜文学+ (山东省农业科学院畜牧兽医研究所；山东省畜禽疫病防治与繁育重点实验室，山东济南250100) 摘要：建立一种检测家兔组织中地克珠利含量的液相色谇串联质谱法(Lc-MS／MS)，研究地克珠利在家兔组织中 的残留及消除规律。选择48只家兔(雌雄各半)。在饲料中加入109／loookg地克珠利混饲，连续饲喂30天。分别 于休药后的第0、l、2、3、4、5、6天，每个时间点随机处死6只家兔(雌雄各半)，取肌肉、肝脏、肾脏组织，DMFI 乙腈沉淀法提取并用LC．MS／MS法检测地克珠利残留量。地克珠利在肾脏中的残留量最高(休药0天为912．6¨班g)， 肝脏次之(体药0天为156．1 pg／kg)，肌肉最低(休药0天为43．1pg，lcg)，在肾脏中的消除速度最快。本方法适于检 测家兔组织中的地克珠利含量。休药0天即可满足欧盟要求。 关键词：地克珠利，组织残留，家兔，消除规律 地克珠利(Diclazuril)属于三嗪苯乙腈化合物，是上世纪八十年代由扬森公司开发研制的非聚醚类 化学合成抗球虫药，具有高效、低毒、广谱的特点，能有效地降低养禽业因球虫感染带来的经济损 失ul。地克珠利能有效抑制球虫内生性发育，减轻肠道病变，降低幼兔的死亡率，在养兔业中也广 泛用于球虫病的防制K1。 已有文献报道地克珠利在鸡组织中的研究【3川，但未见地克珠利在家兔组织中的残留消除规律研 究。本文采用LC-MS／MS测定地克珠利在家兔组织中的含量，旨在为制定家兔地克珠利合理的休药 期提供依据。 1材料 1．1试验兔 选择45～55Et龄新西兰幼兔(体重1379±16 g)48只(雌雄各半)，由山东省农科院试验种兔场 提供[SCXK(鲁)2009-0013]。笼养，每笼2只。 1．2地克珠利 典》的规定进行全检。 1．3仪器设备 Agilent 6410三重 壤金项目：国家兔产业技术体系(项目编号：CARS．44．B．5)。 作者简介：杨丽萍，女，副研究员，主要研究方向：家兔生产、家兔遗传育种。E-mail：yanglp682@163．tom +通讯作者：姜文学(1963一)，男，研究员，从事家兔生产研究。E-mail：jwx0127@163．tom ．247． “全国家兔饲料营养与安全生产学术交流会”论文集 电子天平；H1850台式高速冷冻离心机；海尔DW-86L386超低温冰箱。 1．4试剂 甲醇，乙腈，乙酸为色谱纯，N，N二甲基甲酰胺(DMF)为分析纯。标准品地克珠利购自中 国兽医药品监察所，由浙江国邦药业有限公司生产，批号：H0130805，含量为99．7％。妥曲珠利由 湖北省武穴市龙翔药业有限公司生产，批号：090103，含量为98．5％。 2方法 2．1给药 混饲，lOg／1000kg饲料，自由采食，饲喂30天。 2．2取样 最后一次给药后，分别于第0、1、2、3、4、5、6天，随机处死6只(雌雄各半)取样，所取 样本不进行任何洗涤或处理，随即对各组织分别包装、贴签、编号，保存于一20℃以下的冰箱中待分 析。每只实验兔的取样部位：肌肉组织(背最长肌)、肝脏一整叶、肾脏。 2．3检测条件 2．3．1液相条件 RX-C18色谱柱，2．1x150mm，51am；ZORBAX 洗针)。 2．3．2质谱条件 4000 Gas 10．0L／min．NebPress 如下：CapillaryV，Drying 40．0psi，Gas350℃， Temp Fragmentorll5，Skimmer 均为单位质量分辨。MRM模式下地克珠利与妥曲珠利的