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第四次猪病学术研讨会会议论文集
关节型鸡白痢沙门菌的分离、鉴定及脉冲场凝胶电泳分型研究
徐成刚徐小芹辛朝安廖明+
(1.华南农业大学兽医学院广州510642;2.农业部动物疫病防控重点开放实验室广州510642)
摘要本研究从广东A公司下属3个肉鸡分公司、广西B公司4个分公司9个肉鸡群发生跗关节、翅关节肿胀
的病鸡肿胀部位,B公司孵化场19日龄死胚跗关节处、B公司种鸡场种蛋蛋壳表面,进行病原分离.鉴定,采用
K—B法对所分离的菌株进行药敏试验,并应用PFGE方法对所分离菌株进行相关性研究。结果显示:从广东A公司
下属3个肉鸡分公司发病肉鸡,广西B公司4个分公司9个发病肉鸡群.B公司孵化场死胚跗关节处,B公司种鸡
场种蛋蛋壳表面共分离到14株鸡白痢沙门菌;所分离菌株对氨苄西林、奈啶酸、青霉素G、利福平高度耐药,耐
药率为100%,对四环素,红霉素耐药率分别高达79%、93%耐药率;从A种鸡场下属3个分场的送检的病鸡所分
离到的菌株具有相同的PFGE图谱,从B公司所属4个分公司发病肉鸡群及B公司种鸡场种蛋表面、B公司孵化场
19日龄死胚跗关节处所分离菌株具有相同的PFGE图谱,不同公司传染源可能为本公司种鸡。结论:鸡白痢沙门菌
能引起雏鸡跗关节,翅关节肿胀;关节型鸡白痢沙门菌为蛋传性病原菌,禽苗在运送到肉鸡饲养场前已经感染或携
带病原茵;鸡胚在孵化过程中有可能已感染致病菌。
关键词 关节型沙门菌PFGE耐药蛋传性疾病
鸡白痢是一种严重危害养鸡业重要细菌性传染病,各种品种、日龄的鸡均有易感性,2~3周龄
以内雏鸡的发病卒与死亡率最高,新发病的雏鸡死亡率可高达100%。临床主要表现为感染后精神
沉郁,绒毛松乱,怕冷扎堆,拉白色糊状稀粪、糊肛、呼吸困难等典型症状【lJ。除引起典型鸡白痢
症状外,鸡白痢沙门菌感染雏鸡后还可以引起胫、跗、肱、桡和尺关节肿胀,导致跛行【2’3’4】,增
加死淘率,在美国、印度、我国台湾地区均有关节犁病例的报道。2005年我国广东省出现由鸡白痢
沙门菌引起以病鸡跛行,跗关节、翅关节有不同程度的肿胀等症状的病例以来【”,广西、湖南、安
徽等地均出现相同病例,这可能是由鸡白痢沙I’J茵的某螳菌株对这些关节部位有亲嗜性而引起Loj,
是鸩白瘌沙fJ氏蔚在我国流行的一个新特点。
该病可引起5~lo%夕匕淘率,给我国肉鸡生产带来较大的损失【51。控制鸡白痢应采取综合防控措
施,但目前对引起关节病变的鸡臼痢沙门菌的病原学特性、传播机制和控制方案并不清楚,所以对
关节型鸡白痢沙门菌进行流行病学调奄,了解该病的传染源、传播途径对防控该病具有苇要意义。
脉冲场凝胶电泳(Pllls—fieldgel
对整个细菌染色体上所有酶切位点的变化进行分析,从整体上反映了不同菌株全部基冈的相关性,
被认为是研究细菌分子流行病学的“金标准”18】,常用丁.评估同一事件中不同菌株间可能存在的关
系,为确定菌株之间的亲缘性、追踪传染源、探索传播途径提供可靠依据一J。
本研究对广东、广西两个公司发生跗关节、翅关节的肉鸩群为研究对象,对种蛋、孵化场死胚、
发病肉鸡进行病原分离、攀定,并应用PFGE方法对所分离菌株进行相关性研究。调查种鸡、孵化
和肉鸡饲养环节中病原菌流行情况及莳株问遗传进化关系,对该病的传染源、传播途径及感染机制
进行探讨,为防控该病提供技术支持和理论依据。
l材料与方法
1.1主要试剂
营养肉汤、普通营养琼脂平板、血甲板按常规方法配制【lo】;API20E生物试剂条(购自法国生
物梅里埃公司);药敏实验质控菌ATCC2592(购自中国兽医药品监察所);沙门氏菌属诊断血清
(购白兰州生物制品研究所):Xba Gold
I酶(购自美困Promega公司);琼脂糖SeaKemAgarose
州天和微生物试剂有限公司),本试验所选药敏试纸共20种:氨苄西林、奈啶酸、青霉素G、利福
平、复方新诺明、头孢他啶、氯霉素、头孢噻肟、头孢吡肟、庆大霉素、甲氧苄啶、多粘菌素B、
诺氟沙星、头孢唑啉、呋喃妥凶、卡那霉素、阿米卡星、链霉素、头孢哌酮、红霉素。
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1.2病原分离鉴定
1.
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