卷柏属药用植物中黄嘌呤氧化酶、脂氧化酶和环氧化酶抑制剂的研究.pdfVIP

中华中医药学会第九届中药鉴定学术会议论文集 但是合_【；lj组的IC50为最低且抑制率最高，说明两药合用药效增强。 4．2试验(见表2)显示不同组药物均能诱导细胞产生凋亡，而且在一定的浓度范围内(例如1099／mL 以’r)有较好的诱导凋亡的作用，并且具有剂量依赖性。两种药物配伍后在较低的剂量下，也能显 示较强的诱导肿瘤细胞凋亡的作用。但是在太高的剂量下(例如5099／mL)，由于浓度太高，药物主 要旱现对细胞的杀伤作用，细胞死亡率大，诱导细胞凋亡的作用无法显示，细胞凋亡率反而降低。 说明在较高的浓度时，各组药物主要显示细胞毒作用，即主要通过直接杀死肿瘤细胞来抑制肿瘤生 K。 表3不同组药物对ca印aSe．3表达的影响(n=8，f±5) on Table--3Effective ofdifferent Caspase··3 groups 图3不同组药物对Caspase-3表达的影响 Table-2 on ofdifferent Effective Caspase一3 groups ～雕ji于】盯～ 一灭贾素玎…一—■嚣霸溺_■焉霸爱爵漾翁 4t3大黄素与姜黄素合用组高、中、低剂量均有较好的诱导凋亡的能力。说明大黄素与姜黄素合用后 诱导细胞凋亡的浓度范闱扩人，药效明显增强，则可降低药物使用剂量，减少单独使用药物可能产 生的毒性反应。这部分实验有待进一步研究。 4．4利用PI染色测定细胞凋亡，测定的时相为细胞DNA正发生断裂，DNA片段化已出现，而更早 期的时相，例如线粒体膜电位的改变、Caspase酶的活化、质膜不对称性的改变等与凋亡密切相关的 信息，都不能通过PI染色检测，冈而对于凋亡更早时相的检测，可通过其它染色方法结合流式细胞 术进行分析。活化的Caspase酶作为细胞凋亡的必要信号分子，对于早期细胞凋亡的检测，具有很 重要的意义，本试验采用Caspase．3表达技术，进一步证实了药物可以诱导肿瘤细胞发生凋亡。本试 验中人黄素+姜黄素组中Caspase．3的阳性表达率明显高丁单用大黄素或单用姜黄素组，说明两者联 合应用增强了诱导凋亡的机制。 4．5以上各项说明大黄素和姜黄素联合用药可有效增强药物的致敏性，增强诱导肿瘤细胞凋亡的作 用，同时降低对细胞的直接毒性。这对两种成分和含有这两种成分的中药的配伍应用，以及在较低 的浓度-卜-(1-1099／mL)发挥作用，提供了理论依据。 卷柏属药用植物中黄嘌呤氧化酶、脂氧化酶和环氧化酶抑制剂的研究 陈科力谭文界万定荣叶丛进徐嘉成范小磊 教育部中药资源和中药复方重点实验室(湖北中医学院)，武汉，430065 达，与自由基产生和炎症、硬化、心血管疾病、衰老、癌症等病理过程密切相关。本项且在卷柏属植物系统鉴定研 中华中医药学会第九届中药鉴定学术会议论文集 究的基础上，比较了7种植物抑制XOD和Lox的能力，发现其乙酸乙酯部位都具有一定抗氧化活性；从三种资源 植物分离得到19个双黄酮、1个黄酮类化合物，其中5个为新化合物，15个成分为首次从这些植物中发现，它们绝 大部分都有一定程度抑制XOD、LOX或／和COx．2的活性；发现穗花衫双黄酮、罗波斯塔黄酮和罗波斯塔黄酮．4’． 甲醚双黄酮3种成分为卷柏属植物共同的特征性成分，它们具有不同程度的抗氧化、抗病毒或抗肿瘤活性，可作为 共同的活性指标成分；发现2种植物总黄酮提取物具有较强的XOD和LOX抑制活性，能显著下调COX．2mRNA， 因而整体能作用于多靶点减少自由基对组织的损伤，控制炎症和疾病的发展。进～步的研究发现它们具有较强的抗 柯萨奇病毒或抗肿瘤作用，这与它们的整体抗炎作用分不开。项目还探索并证实了活性成分之间具有的协同增效作 用，发现总活性成分提取物较之活性较强的单体在作用上具有更强的比较优势，该项研究已经发表和接受了18篇论 文，有2篇为SCI收录。 关键词：卷柏属、黄嘌呤氧化酶(xoo)、脂质氧化酶(LOX)、环氧化酶II(cox．2)、双黄酮 些酶的高度表达，与自由基产生和炎症、硬化、心血管疾病、衰老、癌症等病理过程密切相关。在 我们的前期研究中，发现细叶卷柏提取物具有较强的黄嘌呤氧化酶(XOD)、脂氧化酶(LOX)和环氧化 酶II(COX-2)抑制活性以及清除自由基的活性，因此，我们对卷柏属几种资源丰富、作用